RICERCA ITALIANA     

Valutazione del possibile impiego di cellule staminali di origine midollare mobilizzate nel sangue periferico, per la rigenerazione di tessuti non-emopoietici

Università degli Studi di Torino

Abstract

Molti recenti studi in vitro suggeriscono come cellule di derivazione osteo-midollare (Bone Marrow-derived Cells, BMC) includano elementi staminali multipotenti, capaci di differenziare in varie linee cellulari adulte, quali gli epatociti, i neuroni, le cellule dei muscoli scheletrici e del miocardio. Inoltre, osservazioni sperimentali hanno mostrato che le BMC possono migrare spontaneamente in vari organi, dando origine a nuove cellule differenziate, in risposta a danni d’organo. Queste ed altre osservazioni hanno stimolato l’interesse per il potenziale uso clinico di BMC allo scopo di riparare organi non-ematopoietici danneggiati. In condizioni basali, la migrazione di BMC in organi non-ematopoietici resta un evento raro. E’ probabile che abbondanti quantità di BMC nel sangue periferico (PB) possano favorire l’insediamento di tali cellule negli organi danneggiati. Da tempo è noto che piccole quote di BMC circolano nel PB e che il ricircolo viene enormemente amplificato dopo chemioterapia e/o somministrazione di citochine. Il fenomeno, noto con il termine di “mobilizzazione”, coinvolge la maggior parte delle BMC, inclusi elementi staminali immaturi. In condizioni di mobilizzazione ottimale, gran parte delle BMC si riversa temporaneamente dal midollo nel PB, circolando anche negli organi non-emopoietici. Pertanto la mobilizzazione di BMC rappresenta un approccio non-invasivo per ottenere abbondanti quantità di BMC, che possono eventualmente insediarsi negli organi danneggiati. Queste osservazioni rendono di particolare interesse ulteriori studi, volti ad ottenere maggiori informazioni sulla mobilizzazione di BMC indotta da citochine, come approccio di terapia cellulare alternativo e non-invasivo, per la riparazione di organi non-emopoietici.

L’obiettivo della proposta di ricerca qui presentata è quello di lanciare e coordinare uno sforzo multidisciplinare, volto a caratterizzare la mobilizzazione di BMC indotta con la citochina G-CSF e definire il potenziale ruolo di questa procedura, nell’ambito delle terapie cellulari di rigenerazione per organi quali: i. il fegato; ii. il sistema nervoso; iii. il tessuto osseo.

Verranno condotti i seguenti studi prospettici:
A. Studio prospettico per valutare efficacia e sicurezza di ripetuti cicli di mobilizzazione con G-CSF delle BMC, in pazienti con cirrosi epatica avanzata
B. Studio prospettico di fase I-II per valutare sicurezza, fattibilità ed efficacia di ripetuti cicli di mobilizzazione con G-CSF delle BMC, in pazienti con sclerosi laterale amiotrofica (SLA)
C. Studio pilota su sicurezza, tollerabilità ed efficacia di una procedura di mobilizzazione di BMC in pazienti affetti da artrosi di ginocchio, sottoposti ad osteotomia tibiale prossimale

L’Unità di Ematologia coordinerà i protocolli di mobilizzazione e gli studi biologici sulle cellule midollari (BMCs) mobilizzate, nei pazienti inseriti nei vari protocolli clinici. Verranno approfonditi i seguenti punti:
• quantificazione delle BMCs, in termini di cellule CD34+ mobilizzate nel PB;
• caratterizzazione immunofenotipica, funzionale e molecolare delle BMCs mobilizzate;
• identificazione della possibile presenza, tra le BMC mobilizzate, di precursori mesenchimali e/o endoteliali;
• distribuzione delle BMCs a livello del liquor e del Sistema Nervoso Centrale nei pazienti affetti da SLA;
• analisi delle caratteristiche funzionali di crescita e differenziazione in vitro delle BMC mobilizzate, e della capacità di tali elementi di differenziazione in vitro verso linee non-ematopoietiche;
• valutazione di possibili correlazioni tra entità e qualità della mobilizzazione di BMC e andamento clinico, dopo la procedura di mobilizzazione
In conclusione, il progetto di studio multidisciplinare qui proposto consentirà di definire il reale impatto clinica dell’approccio con mobilizzazione di BMC nell’ambito delle nuove terapie cellulari indirizzate alla riparazione e rigenerazione di organi non-ematopoietici <<<

Coordinatore Scientifico del Programma di Ricerca

Corrado Tarella Università degli Studi di TORINO

Obiettivo del Programma di Ricerca

Molti recenti studi in vitro suggeriscono che le cellule di derivazione osteo-midollare (Bone Marrow-derived cells, BMC) includono elementi staminali multipotenti, in grado di differenziare in varie linee cellulari adulte, quali gli epatociti, i neuroni, le cellule dei muscoli scheletrici e del miocardio. Inoltre, osservazioni sperimentali hanno mostrato che le BMC sono in grado di migrare spontaneamente in vari organi, e dare origine a nuove cellule differenziate, in risposta a danni d’organo. Assai suggestivo per questo tipo di fenomeno è il riscontro, nel fegato di soggetti sottoposti a trapianto di midollo, di cellule del donatore, di origine midollare, che presentano marcatori di differenziazione epiteliale ed epatica. Più recentemente, è stato dimostrato che BMC esprimono multipli marcatori di tipo epiteliale ed epatocitario quando vengono trapiantati in sistemi animali sperimentali, ove sia indotto un danno epatico. Ulteriori studi in modelli animali hanno indicato che le BMC possono contribuire alla rigenerazione di tessuto epatico o miocardio, dopo una necrosi acuta o subacuta. Tutte queste ed altre osservazioni, hanno stimolato il crescente interesse per il potenziale uso clinico di BMC allo scopo di riparare organi non-ematopoietici danneggiati.

In condizioni basali, la migrazione di BMC in organi non-ematopoietici resta un evento raro. E’ probabile che un ricircolo nel sangue periferico (PB) di abbondanti quantità di BMC possa favorire l’insediamento di tali cellule negli organi danneggiati. Presso il nostro Istituto, in collaborazione con i Dipartimenti di Cardiologia e di Gastroenterologia, sono già stati conclusi studi pilota, per valutare fattibilità e tossicità di procedure di mobilizzazione di BMC in pazienti con gravi patologie di cuore o fegato. Il risultato più rilevante di questi studi pilota è consistito nella dimostrazione della fattibilità e buona tolleranza di una procedura di stimolazione della mobilizzazione di BMC in pazienti con grave coronaropatia o in pazienti con epatopatia cirrotica in fase pre-terminale. Alcuni recenti studi non hanno evidenziato significativi benefici da una procedura di mobilizzazione di BMC in pazienti con infarto miocardico acuto. Viceversa, diversi altri studi, sia nell’uomo che in modelli sperimentali, indicano il potenziale beneficio clinico della stimolazione alla circolazione periferica delle BMC, come trattamento per patologie di vari organi. Va inoltre ricordato come il sangue periferico, durante la mobilizzazione, rappresenti un facile accesso ad abbondanti quantità di cellule staminali immature, che possono essere raccolte, manipolate ed espanse in vitro e da ultimo re-iniettate negli organi danneggiati. Tutte queste considerazioni rendono di estremo interesse nuovi studi focalizzati su programmi di mobilizzazione di BMC dopo stimolo con citochine. Tale procedura può rappresentare un approccio non-invasivo, con ampie potenzialità di impiego, nell’ambito delle nuove terapie cellulari, indirizzate alla rigenerazione di organi non-emopoietici danneggiati.

L’obiettivo della proposta di ricerca qui presentata è quello di lanciare e coordinare uno sforzo multidisciplinare, volto a caratterizzare la mobilizzazione di BMC indotta con la citochina G-CSF e definire il potenziale ruolo di questa procedura, nell’ambito delle terapie cellulari di rigenerazione per organi quali: i. il fegato; ii. il sistema nervoso; iii. il tessuto osseo.

Le Unità di Ricerca che partecipano a questo progetto multidisciplinare focalizzeranno gli studi su specifici obiettivi, qui dettagliati:
1. verificare la tollerabilità e la efficacia clinica di ripetute procedure di mobilizzazione di BMC, indotta con G-CSF, in pazienti con epatopatia cirrotica avanzata; l’efficacia potrà essere stabilita seguendo nel tempo l’andamento dei tests di funzionalità epatica e valutando la sopravvivenza complessiva; tali parametri verranno poi confrontati con quelli di soggetti, con analoga patologia cirrotica, non elegibili al trapianto di fegato, e seguiti clinicamente con periodico monitoraggio clinico-strumentale;
2. verificare la tollerabilità e la efficacia clinica di ripetute procedure di mobilizzazione di BMC in pazienti con sclerosi laterale amiotrofica (ALS);
3. verificare la eventuale diffusione di BMC mobilizzate a livello del liquor cefalo-rachidiano e più in generale a livello del sistema nervoso centrale;
4. monitorare l’andamento della malattia, nel primo anno dopo mobilizzazione indotta con G-CSF, in pazienti con sclerosi laterale amiotrofica (ALS);
5. verificare la tollerabilità e la efficacia della mobilizzazione di BMC, indotta con G-CSF, nello stimolare la osteogenesi, in un gruppo di pazienti affetti da artrosi monocompartimentale e sottoposti a osteotomia tibiale prossimale con cuneo di apertura mediale, colmato con sostituto osseo a proprietà biologiche note;
6. caratterizzare la quantità e la qualità delle BMC mobilizzate nel PB, in soggetti con varie patologie d’organo; in particolare, gli studi biologici dovrebbero essere indirizzati a definire:
a. l’entità della mobilizzazione di BMC, determinata mediante conteggio delle cellule CD34+ve, circolanti nel PB;
b. la variabile espressione sulle BMC mobilizzate di marcatori associati agli elementi staminali più immaturi;
c. la variabile espressione sulle BMC mobilizzate di marcatori di differenziazione epiteliale;
d. la possibile presenza, tra le BMC mobilizzate, di elementi precursori mesenchimali e/o endoteliali;
e. le caratteristiche funzionali di crescita e differenziazione in vitro delle BMC mobilizzate, così come la capacità di differenziazione in vitro verso linee non-ematopoietiche;
7. indagare qualsiasi possibile correlazione tra entità e qualità della mobilizzazione di BMC e l’andamento clinico, dopo la procedura di mobilizzazione <<<

Durata

24 mesi

Base di partenza scientifica nazionale o internazionale

Molti recenti studi in vitro suggeriscono come cellule di derivazione osteo-midollare (Bone Marrow-derived Cells, BMC) includano elementi staminali multipotenti, capaci di differenziare in varie linee cellulari adulte, quali gli epatociti, i neuroni, le cellule dei muscoli scheletrici e del miocardio (1-2). Inoltre, osservazioni sperimentali hanno mostrato che le BMC possono migrare spontaneamente in vari organi, dando origine a nuove cellule differenziate, in risposta a danni d’organo (3-6). Assai suggestivo per questo tipo di fenomeno è il riscontro, nel fegato di soggetti sottoposti a trapianto di midollo, di cellule midollari del donatore che presentano marcatori di differenziazione epiteliale ed epatica (7). Più recentemente, è stato dimostrato che BMC esprimono multipli marcatori epiteliali ed epatocitari quando vengono trapiantati in sistemi animali sperimentali, ove sia indotto un danno epatico (8-9). Ulteriori studi in modelli animali hanno indicato che le BMC possono contribuire alla rigenerazione di tessuto epatico o miocardio, dopo una necrosi acuta o subacuta (10-11). Tutte queste ed altre osservazioni hanno stimolato l’interesse per il potenziale uso clinico di BMC allo scopo di riparare organi non-ematopoietici danneggiati.

La capacità delle BMC di ripopolare tessuti non-ematopoietici sembra un dato ormai accettato, ma non è chiaro quali siano le cellule midollari più coinvolte. Tra gli elementi potenzialmente in grado di contribuire alla riparazione del danno, vanno considerate: le staminali cellule ematopoietiche, le cellule staminali stromali/mesenchimali, i precursori endoteliali, e infine, di recente identificazione, le BM-derived multipotent stem cells (hBMSCs), che apparentemente non appartengono ad alcuna popolazione osteo-midollare sinora conosciuta (2,12-14). Ancor meno si sa sul reale meccanismo della “plasticità”, che consente alle BMC di rigenerare tessuti assai diversi (15). I principali meccanismi proposti per spiegare questo fenomeno sono: i. presenza di multipli tipi cellule staminali, ciascuno con distinta capacità differenziativa; ii. presenza di un solo tipo di cellula staminale pluripotente, altamente immatura, dotata di un’amplissima capacità differenziativa; iii. presenza di cellule staminali stabilmente orientate verso la differenziazione ematopoietica, che in situazioni particolari possono “transdifferenziare”, ovvero differenziare verso altre linee cellulari mature; iv. eventualità che non si tratti di una vera differenziazione delle BMC in tessuti non-ematopoietici, ma di fusioni cellulari tra BMC circolanti e le cellule presenti negli organi danneggiati. Qualsiasi sia il meccanismo, resta il fatto che le BMC rappresentano una sorgente cellulare tra le più agevoli da sfruttare per terapie cellulari volte alla riparazione di organi danneggiati.

In condizioni basali, la migrazione di BMC in organi non-ematopoietici resta un evento raro. E’ probabile che abbondanti quantità di BMC nel sangue periferico (PB) possano favorire l’insediamento di tali cellule negli organi danneggiati. Da tempo è noto che piccole quote di BMC circolano nel PB e che il ricircolo viene enormemente amplificato dopo chemioterapia e/o somministrazione di citochine (16-17). Il fenomeno, noto con il termine di “mobilizzazione”, coinvolge la maggior parte delle BMC, inclusi elementi staminali immaturi (18). In condizioni di mobilizzazione ottimale, gran parte delle BMC si riversa temporaneamente dal midollo nel PB, circolando anche negli organi non-emopoietici (19). Pertanto la mobilizzazione di BMC rappresenta un approccio non-invasivo per ottenere abbondanti quantità di BMC, che possono eventualmente insediarsi negli organi danneggiati.

Il granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) è al momento il fattore più usato per la mobilizzazione di BMC (20). Tale procedura è stata di recente considerata come possibile approccio per ottenere cellule staminali idonee a riparare il danno di organi non-emopoietici. Attualmente però il valore clinico della mobilizzazione di BMC rimane controverso. Studi recenti su pazienti con infarto acuto del miocardio non hanno infatti dimostrato un chiaro beneficio (21-22). Al contrario in modelli murini ove sia indotta un’ischemia cardiaca o cerebrale, la mobilizzazione di BMC indotta da citochine ha migliorato la sopravvivenza (6,23-24) . Altri studi hanno suggerito come la mobilizzazione da citochine possa promuovere la riparazione tessutale nelle patologie epatiche croniche o acute. Inoltre il trattamento con G-CSF ha significativamente migliorato la sopravvivenza e il quadro istologico nei topi dopo danno farmcologico, promuovendo soprattutto i meccanismi di riparazione endogeni (25-26). Va poi segnalato che miglioramenti nella funzionalità di organi ischemici, osservati con la mobilizzazione, sono in parte da attribuire all’induzione di vasculogenesi e neo-angiogenesi nelle aree di ipossia (27-29). In effetti, la mobilizzazione citochina-indotta, comporta un flusso di abbondanti quantità di BMC che possono essere successivamente prelevate, eventualmente manipolate in vitro e quindi re-impiantate in vivo negli organi danneggiati.

Tutte queste osservazioni rendono di particolare interesse ulteriori studi, volti ad ottenere maggiori informazioni sulla mobilizzazione di BMC indotta da citochine, come approccio di terapia cellulare alternativo e non-invasivo, per la riparazione di organi danneggiati non-emopoietici.

L’utilizzo delle cellule staminali di derivazione midollare (BMC) sembra particolarmente adatto nella rigenerazione tessutale per i casi di insufficienza epatica avanzata. Il trapianto di fegato ortotopico (OLT) rappresenta l’opzione terapeutica più consolidata per l’insufficienza epatica acuta e cronica. Tuttavia il numero di trapianti eseguiti in Italia non soddisfa l’incremento della richiesta rispetto al numero dei donatori di organo disponibili (30). Per i pazienti in lunga lista d’attesa, e per coloro che non sono eleggibili al trapianto per controindicazioni assolute, sono necessarie opzioni terapeutiche alternative (31-32). In particolare, alcuni la terapia cellulare è una possibile valida alternativa (11,32). La terapia cellulare include sia l’utilizzo di epatociti maturi, derivati da organi espiantati, sia di cellule staminali di origine ematopoietica. In effetti, studi in vitro e in vivo sull’animale e iniziali studi sull’uomo sembrano essere promettenti (8-9,11-12,33-35).

Esistono ipotesi controverse sul possibile meccanismo di rigenerazione tessutale epatica (7,32,36). Alcuni gruppi sostengono che il principale contributo alla rigenerazione cellulare epatica derivi dalle cellule staminali midollari, mentre altri sostengono che le cellule staminali epatiche endogene attivate, siamo la principale fonte di epatociti maturi . Un'altra ipotesi fortemente accreditata è quella che le cellule staminali midollari non si differenzino in cellule mature, ma piuttosto si fondano con gli epatociti stessi, apportando alla nuova cellula fusa il loro patrimonio genetico e citoplasmatico. Tuttavia molti studi suggeriscono che siano le citochine e i fattori di crescita prodotti da cellule ematopoietiche infuse a favorire la funzione e la riparazione epatica in animali adulti, anche senza che si formino nuovi epatociti (25-26). Inoltre l’infusione di G-CSF previene la morte di ratti con tossicità da CCl4 anche in assenza di trapianto cellulare. Nell’uomo la presenza di cellule di derivazione midollare nel fegato è stata dimostrata per la prima volta nel 2000 da Theise et al., che hanno rilevato epatociti e di colangiociti di origine midollare, identificabili nel fegato in percentuale variabile dal 2 sino al 42% (37). In realtà, studi successivi hanno confermato il dato, ma con percentuali molto più basse (30,31).

La dimostrazione nei modelli animali che le BMC sono in grado di correggere disordini epatici di tipo metabolico, degenerativo acuto o cronico sull’animale ha stimolato l’ inizio studi clinici anche sull’uomo. Due lavori hanno già dimostrato la possibilità di applicare cellule di origine midollare a livello epatico (33-35). Nel recente lavoro di Gordon et al. cellule midollari CD34+, mobilizzate con G-CSF, sono state inoculate a livello epatico attraverso l’arteria epatica o la vena porta in 5 pazienti affetti da cirrosi epatica. La metodica si è dimostrata sicura, senza effetti collaterali di rilievo e ha portato miglioranti clinici nei pazienti trattati. In questi anni, la nostra Unità di Epatologia all’Università di Torino, in collaborazione con l’Unità di Ematologia, è stata coinvolta in un progetto sperimentale volto a valutare il possibile utilizzo clinico delle BMC nei pazienti con insufficienza epatica avanzata. Il nostro studio iniziale ha potuto confermare la presenza di microchimerismo epatico in pazienti trapiantati di fegato (38). In seguito abbiamo effettuato uno studio pilota, che ha dimostrato la fattibilità e la sicurezza della mobilizzazione di BMC mediante G-CSF in pazienti con cirrosi epatica in fase terminale (39). I pazienti hanno ricevuto una somministrazione di G-CSF per 3 giorni consecutivi durante un ricovero di 5 giorni totali. I risultati sono stati incoraggianti in quanto la mobilizzazione è stata ottenuta in tutti i pazienti inclusi nello studio. È stata inoltre osservata la co-espressione del CD 34 e di altri marcatori staminali e di differenziazione. Un paziente è stato sottoposto a 2 cicli terapeutici mostrando una migliore mobilizzazione dopo il secondo ciclo. La procedura si è dimostrata sicura e ben tollerata, con alcuni miglioramenti clinici. Sulla base di queste premesse, sembra di sicuro interesse uno studio prospettico di fase II, per verificare su una casistica più ampia non solo la sicurezza ma anche l’eventuale efficacia clinica di mobilizzazioni di BMC.

La mobilizzazione di BMC è poi una stimolante opzione terapeutica per le patologie degenerative del sistema nervoso centrale, quale la sclerosi laterale amiotrofica (SLA), che è un grave disturbo neurologico progressivo caratterizzato da una degenerazione selettiva dei motoneuroni spinali, bulbari e corticali. L’incidenza media annuale della SLA è di 1-2 casi per 100.000 abitanti (40). La progressiva degenerazione dei motoneuroni è spiegata da vari meccanismi, quali lo stress ossidativo, un danno dei neurofilamenti, alterazioni mitocondriali, citotossicità indotta da glutammato e alterazione della risposta all’ipossia. Gli obiettivi della terapia della SLA sono di individuare trattamenti in grado di ridurre o bloccare la perdita neuronale o di ripristinare i circuiti neuronali danneggiati.

Recenti studi hanno sollevato l’interesse per l’impiego di BMC per cercare di riparare tessuto nervoso danneggiato e quindi per eventuali applicazioni per la SLA, patologia caratterizzata da una degenerazione neuronale. In particolare, è stato riportato che, in presenza di stimoli appropriati e condizioni ambientali particolari, le cellule staminali del midollo osseo mostrano segni di transdifferenziazione in cellule neurali o in cellule gliali (41-42). In vivo, vi sono indicazioni di miglioramento funzionale in modelli animali di ischemia cerebrale e malattia di Parkinson (MP) con l’uso di BMC. Nello studio Kopen et al. (43) su un modello animale di MP è stato dimostrato che dopo iniezione di BMC intraventricolare di animali neonati si verificava una migrazione di queste cellule nel proencefalo e nel cervelletto e che alcune di queste cellule esprimevano neurofilamenti, proteine tipiche dei neuroni. Negli studi di Li et al. e Zhao et al. su modelli animali di stroke ischemico, 2-6 settimane dopo l’iniezione intrarteriosa o l’impianto nel tessuto cerebrale di BMC marcate si rilevava la presenza di tali cellule in tutto il territorio infartuato e nell’area circostante l’infarto (44-45). L’analisi istologica ha rivelato che le cellule marcate esprimevano marcatori per gli astrociti, l’oligodendroglia e i neuroni. Questi animali, inoltre, manifestano anche un miglioramento delle prestazioni funzionali.

Diversi studi sull’animale hanno inoltre dimostrato che le BMC possono migrare dal circolo periferico al sistema nervoso centrale (46-48) ove possono dare origine sia a cellule microgliali sia a cellule neuroectodermiche. Questa capacità è stata dimostrata in vivo anche nell’uomo (49). Queste osservazioni sperimentali giustificano l’interesse per l’impiego di BMC per il trattamento della SLA. Tuttavia, va sottolineato che è ancora molto difficile, al momento, stabilire se sia realmente possibile ottenere una ricostruzione della rete neurale con l’uso di BMC, soprattutto in una malattia a decorso rapido e progressivo quale la SLA. I protocolli clinici dovrebbero pertanto verificare la sicurezza e la fattibilità della mobilizzazione di BMC nei paziente con SLA, e inoltre la possibilità di diffusione delle BMC nel liquido cerebro-spinale deve essere accertata. Successive analisi potranno poi valutare il potenziale beneficio clinico delle procedure di mobilizzazione delle BMC.

Infine le BMC possono essere considerate nella terapia cellulare per la rigenerazione ossea.
L’importanza di una rapida ricostituzione ossea è ovvia negli interventi ossei, specie nelle procedure chirurgiche di osteotomia; in particolare, una accelerata rigenerazione ossea sembra utile nell’osteotomia tibiale, procedura di largo impiego come opzione per il trattamento dell’ artrosi mediale e nel morfotipo varo.

L’osteotomia valgizzante tibiale alta è una tecnica molto diffusa e consiste nel praticare un’apertura mediale cuneiforme di dimensioni proporzionali all’entità della correzione da ottenere. Gli approcci per stimolare il riempimento del gap sono molteplici (50-52). Le due principali alternative, innesti di osso autologo o omologo, presentano entrambi vantaggi e svantaggi senza risolvere completamente i problemi legati al riempimento del gap (53). Vista la reale necessità di stimolare la crescita ossea, l’utilizzo delle cellule staminali in ortopedia sta diventando un approccio di estremo interesse, per la riparazione tessutale in molte patologie come le lesioni condrali, le fratture, le pseudoartrosi, l’osteogenesi imperfecta, la degenerazione discale vertebrale, nelle artrodesi vertebrali e nell’integrazione di sostituti dell’osso utilizzati in procedure chirurgiche come le revisioni nella chirurgia protesica dell’anca (54-58). In genere, si utilizzano BMC autologhe, prelevate con ago-aspirato in anestesia generale. Una procedura alternativa è la mobilizzazione delle BMC nel sangue periferico (PB). La mobilizzazione indotta da citochine è una procedura interessante, in quanto semplice, non invasiva e potenzialmente efficace. La circolazione prolungata nel sangue periferico di alti livelli di cellule staminali e di cellule progenitrici potrebbe permettere la colonizzazione di aree sede di interventi chirurgici. Proprio in base a questa considerazione, è nostro intento pianificare uno studio per valutare la sicurezza ed il potenziale terapeutico di BMC circolanti, dopo somministrazione di G-CSF, in un gruppo di pazienti affetti da artrosi monocompartimentale e sottoposti a osteotomia tibiale prossimale con cuneo di apertura mediale, colmato con sostituto osseo a proprietà biologiche note.

In conclusione, le varie considerazioni sinora discusse, rappresentano il razionale per l’ avvio di studi clinici prospettici per verificare la sicurezza, l’applicabilità e l’efficacia della mobilizzazione di BMC in varie condizioni cliniche, tra le quali l’insufficienza epatica avanzata, la SLA e la rigenerazione ossea post-chirurgica. <<<