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PROGRAMMA DI RICERCA
italiano - english
Unità di Ricerca
- Università degli Studi di SASSARI
BIOLOGIA ANIMALE
- Università degli Studi di CAGLIARI
SCIENZE APPLICATE AI BIOSISTEMI
- Università degli Studi di MILANO
PATOLOGIA ANIMALE, IGIENE E SANITA' PUBBLICA VETERINARIA
- Università degli Studi di PAVIA
SCIENZE MORFOLOGICHE EIDOLOGICHE E CLINICHE
- Università degli Studi di NAPOLI "Federico II"
PATOLOGIA E SANITA' ANIMALE
Programmi di ricerca simili:
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Classificazione scientifico-disciplinare
- Area scientifico disciplinare: Scienze agrarie e veterinarie
- Area scientifico disciplinare: Scienze mediche
Classificazione brevettuale
- HUMAN NECESSITIES
- AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- ANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
Classificazione geografica
- Regione: Sardegna
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Parole Chiave
ECHINOCOCCOSI CISTICA, EPIDEMIOLOGIA, GENOTIPIZZAZIONE, ANIMALI IN PRODUZIONE ZOOTECNICA, CANI, UOMOSTUDI COMPARATIVI SULL'ECHINOCOCCOSI CISTICA DEGLI ANIMALI E NELL'UOMO
Università degli Studi di SassariAbstract
La ricerca si propone lo studio dello stato attuale dell'Echinococcosi Cistica (CE) aggiornando l'epidemiologia dell'EC negli animali da reddito e nel cane in aree a diversa pressione parassitaria (alta, media, bassa). Verrà condotta un'analisi morfo-strutturale delle Idatidi per una classificazione standard delle cisti e per monitorare la loro evoluzione nel tempo. Verrà condotto inoltre uno studio immunologico su ovini macellati nelle diverse aree al fine di individuare markers sull'andamento dell'infestazione e utili sia a scopo diagnostico che prognostico per studiare una eventuale polarizzazione Th1/Th2 della risposta immunitaria. In aziende ad alto rischio verranno monitorati capi "sentinella" mediante analisi ultrasonografica e studio immunologico per valutare la pressione parassitaria mediante valutazione delle IG e delle citochine prodotte.Nell'uomo verranno svolte indagini siero-epidemiologiche al fine di determinare il grado di diffusione della parassitosi su campioni di popolazione di aree a rischio diverso, anche con indagini retrospettive. Verrà condotto un approfondimento sugli aspetti morfo-strutturali delle idatidi per standardizzare le tipologie delle cisti e tracciare un quadro della storia naturale della cisti. Attraverso lo studio dello sviluppo parassitario mediante infestazione sperimentale verrà valutata la risposta precoce e tardiva all'infestazione in topi di diverso ceppo inbred e immunodeficienti. IL4, IL12, TNF alfa e INF gamma, e l’espressione di alcuni recettori di membrana (membri della famiglia dei Tool-like Receptors, in particolare TLR2) saranno valutati nelle cellule da sangue intero di donatori sani ed in pazienti con EC pre e post trattamento e anche in pazienti con EC non trattata, con monitoraggio dell'evoluzione clinica. I risultati verranno confrontati con la cinetica delle sottoclassi IgG (IgG1,IgG2,IgG4) per studiare possibili relazioni fra lo stadio cistico e le variazioni di titoli di sottoclassi. I dati clinici ed ecografici (dimensioni, stadio della cisti,e variazioni degli stessi) saranno registrati e confrontati con eventuali variazioni del profilo delle citochine, con i genotipi dei ceppi di echinococco e con la cinetica delle sottoclassi anticorpali. Verrà inoltre determinatal’espressione di alcune citochine a livello di mRNA su cellule di sangue intero prelevato da pazienti. Verrà valutata l’espressione di alcune citochine markers delle risposte Th1 e Th2 (IL4, INFgamma, IL12 e TNFalpha) e di alcuni recettori di membrana (membri della famiglia dei TLRs, in primo luogo TLR2) in cellule di sangue periferico da controlli sani e da pazienti con EC prima e dopo diversi tipi di trattamento, ma anche da pazienti con EC non trattatati e seguiti nel corso dell’evoluzione clinica della malattia mediante Real Time-PCR. Verrà inoltre condotto uno studio per la caratterizzazione biomolecolare dei parassiti al fine di individuare varianti genetiche o strains sia negli animali che nell'uomo. Le cisti di origine umana e animale saranno ulteriormente caratterizzate a livello genetico mediante analisi di sequenza di una serie di marcatori nucleari. In particolare, verranno amplificati e sequenziati i sei geni nucleari utilizzati in Bart et al. (2004); inoltre, verranno condotte analisi sui marcatori microsatelliti (Bartholomei-Santos et al., 2003). Le analisi sui marcatori nucleari sarà finalizzato ad investigare aspetti della genetica di popolazione del parassita: differenze nelle frequenze alleliche, tassi di ricombinazione, suddivisione in sottopopolazioni. Per valutare il grado di conoscenza degli allevatori nei confronti dell'EC, verrà condotto uno studio socio-epidemiologico sul grado di consapevolezza e conoscenza degli allevatori sulle principali metacestodosi. I risultati delle varie indagini epidemiologiche verranno utilizzati infine per l'elaborazione attraverso i sistemi GIS di mappe parassitologiche. <<<
Coordinatore Scientifico del Programma di Ricerca
Giovanni Garippa Università degli Studi di SASSARIObiettivo del Programma di Ricerca
2.1 OBIETTIVI DEL PROGRAMMA DI RICERCALa ricerca si propone lo studio dell'Echinococcosi Cistica (CE) negli animali e nell'uomo alla luce delle mutate condizioni sia dell'allevamento che, più in generale, socio-culturali, normative, sanitarie ed ambientali, per fornire un aggiornamento sullo stato di rischio.
Il progetto prevede inoltre la messa a punto di nuove metodologie di studio e analisi nonchè di fornire strumenti innovativi per il monitoraggio e la sorveglianza di questa importante zoonosi.
In particolare gli obiettivi del programma di ricerca possono essere così sinteticamente schematizzati:
ANIMALI
1. AGGIORNAMENTI EPIDEMIOLOGICI - L'obiettivo è quello di aggiornare le conoscenze epidemiologiche sulla diffusione della Echinococcosi Cistica negli animali da reddito e nel cane in aree a diversa pressione parassitaria (alta, media, bassa) attraverso la rilevazione diretta al mattatoio della prevalenza della parassitosi. Si potrà così delineare un quadro della situazione epidemiologica della zoonosi in assenza di qualunque intervento specifico di prevenzione e controllo come in Campania. Mentre in Sardegna consentirà il raffronto con la situazione dei primi anni ‘90 immediatamente successivi alla sperimentazione in alcune aree dell'isola di un piano di controllo, successivamente interrotto.
2. APPROFONDIMENTI MORFOSTRUTTURALI - Verrà condotta un'analisi morfo-strutturale delle Idatidi allo scopo di arrivare ad una standardizzazione delle tipologie di cisti riscontrate che consenta uno studio longitudinale con individuazione delle trasformazioni intervenute nel tempo, il monitoraggio di eventuali azioni di prevenzione e controllo e il raffronto in termini epidemiologici nelle diverse aree interessate dalla ricerca.
3. AGGIORNAMENTI DIAGNOSTICO/IMMUNOLOGICI - Si procederà allo studio immunologico dei capi ovini macellati nelle diverse aree al fine di individuare markers della severità della malattia e dell'andamento dell'infestazione utili sia a scopo diagnostico che prognostico per studiare una eventuale polarizzazione Th1/Th2 della risposta immunitaria, così come suggerito dai dati ottenuti in campo umano. A tale scopo si procederà alla messa a punto di tecniche immunologiche (immunoenzimatiche, W. Blotting) per la ricerca di immunoglobuline specifiche per gli Ag di EC con valutazione della sensibilità, specificità e del valore predittivo positivo e negativo, all'allestimento di colture cellulari di linfociti e alla successiva messa a punto di tecniche per la determinazione delle citochine secrete mediante analisi immunoenzimatica del supernatante e/o del siero.
4. MONITORAGGIO DELL'EVOLUZIONE QUALI-QUANTITATIVA DEL QUADRO PARASSITARIO - Per valutare la pressione parassitaria, senza tener conto degli effetti del cumularsi di ripetute infestazioni susseguitesi nel tempo e per fornire elementi di maggiore predittività, la ricerca un modello di monitoraggio, in aziende ad alto rischio, di capi "sentinella" individuati negli animali più giovani (1-2 anni), e pertanto di recente infestazione, da monitorare mediante analisi ultrasonografica e prelievi ematici per la raccolta di siero e cellule, per lo studio immunologico in termini di Ig e citochine prodotte.
5. AGGIORNAMENTI BIOMOLECOLARI - Questa azione ha come obiettivo la caratterizzazione dei genotipi di Echinococcus granulosus e di mettere in relazione i risultati fra gli isolati ottenuti delle varie specie animali e nell'uomo. In tal modo sarà possibile determinare dei quadri di epidemiologici biomolecolari che consentiranno una maggiore comprensione dell'ecobiologia del parassita. Sulla base delle frequenze geniche di Echinococcus granulosus, sarà possibile affrontare problemi di tipo tassonomico e di genetica delle popolazioni con particolare riguardo alla valutazione dell'eventuale flusso genico tra ceppi (strains) strettamente correlati così come sul modo prevalente di riproduzione di questi organismi ermafroditi (cross-fertilization o self-fertilization) equindi le possibili implicazioni sul potenziale riproduttivo e sulla fitness.
UOMO
1. AGGIORNAMENTI EPIDEMIOLOGICI - Determinare il grado di diffusione della parassitosi nell'uomo attraverso indagini sieroepidemiologiche su campioni diversi di popolazione di aree a diverso grado di rischio già individuate, quando possibile anche con indagini retrospettive su materiali raccolti nel tempo nelle diverse aree di studio.
2. INDAGINI MORFOSTRUTTURALI - Approfondimento degli studi sugli aspetti morfologici e strutturali delle cisti idatidee nell'uomo finalizzati a standardizzare le tipologie di cisti e di tracciare un quadro della storia naturale della cisti idatidea nel fegato.
3. AGGIORNAMENTI IMMUNOLOGICO/DIAGNOSTICI - La ricerca prevede uno studio immunologico da correlare ai quadri morfo-strutturali, con allestimento di colture cellulari di linfociti da sangue periferico per la determinazione nel surnatante, con metodica immunoenzimatica, delle citochine prodotte e con la determinazione dei diversi isotipi immunoglobulinici specifici (IgG1,IgG3, IgG4, IgE) nel siero, ove possibile analizzando la cinetica di risposta prima e dopo asportazione della cisti. Questo permetterà di individuare markers di valore diagnostico/prognostico utili anche per il clinico nella scelta terapeutica. Verranno infine valutati e confrontati i dati clinici ed ecografici (dimensioni e stadio della cisti, e variazioni delle stesse) con eventuali variazioni del profilo delle citochine con la cinetica delle sottoclassi anticorpali e con i genotipi dei ceppi di echinococco.
4. AGGIORNAMENTI BIOMOLECOLARI - Studio della presenza/circolazione di ceppi o varianti genetiche di Echinococcus granulosus nell'uomo attraverso la caratterizzazione biomolecolare di materiale idatideo.
5. AGGIORNAMENTO IMMUNOLOGICO NEL MODELLO SPERIMENTALE - Attraverso lo studio dello sviluppo parassitario mediante infestazione sperimentale in topi di diverso ceppo inbred, e in topi immunodeficienti della risposta precoce e tardiva. In particolare la ricerca prevede la infestazione di gerbilli e di ceppi diversi di topi con carica parassitaria diversa per lo studio sia in termini quantitativi che morfologico-strutturali dello sviluppo di eventuali ceppi del parassita individuati.
6. STUDIO SOCIO-EPIDEMIOLOGICO - Per valutare il grado di conoscenza degli allevatori nei confronti dell'EC, verrà condotto attraverso la distribuzione di un questionario anonimo finalizzato al censimento dei di cani presenti, l'effettuazione e le modalità dei trattamenti nei confronti dei Cestodi nel cane, acquisizione di informazioni sulle modalità di smaltimento dei visceri, e sul grado di consapevolezza e conoscenza degli allevatori sulle principali metacestodosi. Le informazioni raccolte verranno successivamente riportate in un database ed elaborate statisticamente.
7. MAPPE PARASSITOLOGICHE - Verranno prodotte mappe parassitologiche attraverso l'elaborazione dei dati ambientali e di quelli relativi alle indagini epidemiologiche attraverso i sistemi GIS <<<
Durata
24 mesiBase di partenza scientifica nazionale o internazionale
L'Echinococcosi Cistica (EC) è una delle zoonosi di maggior impatto nel mondo ed in particolare nel bacino del Mediterraneo. Come anche recentemente indicato dallo “Scientific Committee on Veterinary measures relating to public health on food-borne zoonosis” della Commissione Europea incaricato di valutare il rischio legato alle zoonosi che causano maggiori problemi in termini di salute pubblica, a dispetto dell'aumento delle conoscenze e dell' apparentemente facile controllo dell'infestazione, a causa dell'intrecciarsi di fattori ambientali, sociali e culturali, resta ancora uno dei problemi di salute pubblica più rilevanti. In Europa CE mostra vaste aree di endemia tra cui la Sardegna, che registra storicamente uno dei tassi più elevati di diffusione sia negli aniamli che nell'uomo, anche se esperienze di altri paesi hanno mostrato che il suo controllo è possibile con un programma ben pianificato e continuo e le analisi costi/benefici indicano che è anche economicamente vantaggioso. Il suo monitoraggio è pertanto centrale per valutare il rischio di malattia, perché consente di raccogliere e analizzare le informazioni in maniera da rilevare l'evoluzione dell'incidenza (uomo) e della prevalenza (animali), di fornire le informazioni necessarie ai "decision makers" sugli interventi da intraprendere e di valutarne gli effetti. Una continua sorveglianza epidemiologica e uno studio del territorio e degli scenari della diffusione consente infatti una valutazione della zoonosi sia in termini quantitativi che qualitativi e permette una valutazione predittiva della sua diffusione. Questo è tanto più importante laddove gli scenari della diffusione appaiono in trasformazione. Nel caso della Sardegna ai notevolissimi mutamenti degli ultimi decenni si stanno attualmente sommando le trasformazioni dovute alla profonda crisi economica del settore. A questo va a sommarsi il prevedibile effetto sulle produzioni del nuovo regime di aiuti comunitari che dopo la riforma della Politica Agricola Comune del 26 giugno 2003 vedrà il disaccoppiamento dell’aiuto comunitario dalla produzione, con un calcolo che terrà invece conto di quanto percepito nel triennio di riferimento 2000-2002. E’ facilmente ipotizzabile quindi che dati gli altissimi costi della produzione, anche in ragione delle straordinarie annate climatiche, della oltremodo scarsa redditività della produzione lattiera, dei danni inflitti dalla blue tongue, non solo gli allevatori avranno meno risorse da destinare agli investimenti, ma saranno costretti a ridurre la quota destinata anche alla cura degli allevamenti e tenderanno a contrarre il numero dei capi allevati fino al limite che la legge sugli aiuti comunitari consente, immettendo quindi sul mercato una quota rilevante di capi adulti. D’altra parte i capi giovani allevati in questo quadro, rischiano, specie in alcune aree, di trovarsi in uno stato di allevamento più precario rispetto al recente passato, che può condurre ad un peggioramento del quadro parassitario (possibile aumento della prevalenza, ri-aumento della quota di cisti fertili) dopo il miglioramento registrato negli ultimi decenni.In questo contesto per il monitoraggio e la sorveglianza della zoonosi una diagnosi di laboratorio sarebbe di estremo vantaggio. Test sierologici specifici sarebbero utili in particolare nei capi giovani dove non è facilissimo identificare le piccole lesioni senza controllo istologico, e una diagnosi ante-mortem sarebbe utile anche dal punto di vista epidemiologico e troverebbero applicazione nell’identificazione e successiva eliminazione di reservoirs isolati di infestazione durante le fasi di consolidamento di un piano di controllo. In genere i tests finora utilizzati non hanno mostrato un grado di specificità e sensibilità accettabile per la sierodiagnosi di singoli animali, condizionati da un certo grado di cross-reattività e dalle reazioni falso-negative legate anche alla debole risposta anticorpale ovina in confronto a quella osservata nell’uomo. Anche se recenti studi che utilizzano il test EITB indicano un certo miglioramento in questo campo. D’altra parte proprio gli studi clinici suggeriscono una correlazione tra lo stato della cisti e il quadro immunitario. In campo umano i diversi tipi di cisti oltre a presentare difficoltà diagnostiche differenti, offrono opportunità terapeutiche diverse e in qualche modo possono condizionare anche la possibilità di complicanze e recidive ma l'analisi già in corso dei diversi quadri istopatologici allo scopo di una classificazione dettagliata che fotografi il reale stato biologico della cisti con il relativo raffronto con i quadri ecografici, e il parallelo studio immunologico, offre lo spunto a nuovi studi sui meccanismi associati alla degenerazione, nell'ipotesi che essi rappresentino un passaggio dalla cisti vitale a quella con cisti figlie, alle forme degenerate, ed infine alla cisti morta.
Una analoga classificazione delle cisti anche in campo animale, condotta grazie ad una standardizzazione delle tipologie cistiche, potrebbe consentire una “misura” anche qualitativa del quadro parassitario per raffronti tra diverse aree, nel corso del tempo e nella monitorizzazione di una Campagna di Controllo. Inoltre sarebbe utile poter correlare ai quadri morfo-strutturali un quadro immunologico per le ripercussioni che questo avrebbe in campo non solo diagnostico, ma anche sieroepidemiologico e di monitoraggio. Gli studi sui meccanismi di evasione dalla risposta immune operativi nella infestazione cronica sia nell’uomo che nel modello sperimentale suggeriscono l’instaurarsi di una risposta di tipo Th2 (funzionale alla sopravvivenza del parassita), contro una risposta Th1 (protettiva) evidenziata nei casi di trattamento chemioterapico efficace. La caratterizzazione delle citochine ovine ha progredito in maniera estremamente significativa negli ultimissimi anni, grazie alla rilevanza dell’ovino nel settore zootecnico in vaste aree del mondo (per es. Australia e Nuova Zelanda) e alla crescente importanza dell’ovino quale modello sperimentale nelle ricerche biomediche. Uno sviluppo interessante è costituito poi dalla messa a punto di metodiche PCR e dalla produzione di Ab specifici monoclonali o policlonali citochino-specifici che possono così essere utilizzati in tests immunochimici allestiti ad hoc per quantificare il livello di citochine prodotte, giacchè, come noto, l’esito di molte infestazioni in termini di resistenza/suscettibilità è determinato dal pattern di risposta delle diverse sottopopolazioni T e delle citochine prodotte. D’altra parte in indagini col modello sperimentale dell'infestazione secondaria il sistema T cellulare appare essenziale per la resistenza, come confermato dall'alta suscettibilità nei topi atimici e dalle alterazioni nelle sottopopolazioni T negli organi linfatici. Nostri studi suggeriscono una risposta di tipo TH0/TH1 nei primi stadi di sviluppo, con una polarizzazione Th2 successiva, che può essere complicata da una immunosoppressione generale negli stadi avanzati dell'infestazione.
Situazione epidemiologica negli ovini e nel cane in Campania
L’Echinococcosi Cistica costituisce ancora oggi una delle parassitosi più diffuse nell’Italia centrale e insulare. In questo territorio, il quadro epidemiologico dell’EC negli animali e nell'uomo è quantomeno incompleto e lacunoso ed i dati relativi a numerose regioni, spesso limitati a informazioni sulla prevalenza negli animali macellati, oltre che non aggiornati, sono spesso contraddittori.
In Campania, ad oggi, oltre a qualche sporadica segnalazione, risultano solo quattro indagini epidemiologiche sulla echinococcosi-idatidosi negli animali. L'indagine più recente è quella svolta nell'ambito del Progetto di Ricerca PRIN 2003 -n°2003070410_001- Echinococcosi animale in Italia: diagnosi e caratterizzazione molecolare, aggiornamenti epidemiologici - presso due macelli della provincia di Caserta per valutare la presenza e la diffusione della echinococcosi-idatidosi nel bufalo asiatico (Bubalus bubalis) di razza Mediterranea Italiana. Questo studio, il primo sull'echinococcosi cistica nel bufalo in Italia, ha consentito di rilevare valori di prevalenza pari al 7,8%. Estremamente scarse e lacunose risultano le conoscenze sulla echinococcosi cistica nell'uomo in Campania.
Situazione epidemiologica negli ovini e nel cane in Sardegna
Il quadro più chiaro sull’epidemiologia della parassitosi negli animali è sicuramente quello sardo, dove gli ultimi dati pubblicati su indagini effettuate in ovini allevati nel nord della Sardegna rilevano una prevalenza del 76%, cioè valori sostanzialmente non differenti rispetto alle indagini precedenti. Tuttavia ulteriori indici epidemiologici quali: percentuale di soggetti portatori di idatidi fertili, infestazioni miste (fegato e polmone) e la presenza di infestazioni massive (>10 cisti/capo), evidenziano una diminuzione della pressione parassitaria.
La riduzione di tali parametri tuttavia non sembrerebbe essere in relazione con una diminuzione della contaminazione ambientale da parte delle forme di propagazione (uova), in quanto è stato evidenziato che anche gli ovini di età inferire ai di due anni (animali sentinella) hanno prevalenze non significativamente differenti rispetto a quelli delle classi di età superiore. E’ evidente quindi che la riduzione di fertilità delle cisti rilevata in questi ultimi possa essere legata ad diversi fattori quali una risposta immunitaria più efficiente non disgiunta dal frequente impiego di benzimidazolici utilizzati nel controllo delle endoparassitosi dell’ovino.
Nei distretti del nord Sardegna, dove l’ovinicoltura ha raggiunto negli ultimi anni un elevato grado di efficienza, le cause che avrebbero potuto determinare una riduzione di “pressione” parassitaria, in particolare della diminuita fertilità delle idatidi, potrebbero essere secondo Bortoletti et al. (1990) riconducibili dunque a differenti motivazioni: riduzione dei fenomeni di transumanza, (CENSIS: l° rapporto sulla situazione sociale della Sardegna), trattamenti antielmintici dei cani, condizioni microclimatiche che influiscono sulla resistenza e maturazione delle uova (estati torride p. e.), selezione genetica degli animali, aumento della competenza imprenditoriale e gestionale degli allevatori.
A tutti questi fattori elencati và aggiunto quello relativo ai trattamenti antielmintici praticati ormai di routine negli ovini anche più volte all’anno con benzimidazolici, che come è stato dimostrato provocano la devitalizzazione delle cisti anche in questa specie. Tuttavia tale diminuzione della fertilità non interessa ancora tutto il territorio della Sardegna, infatti i dati relativi ad aree della Sardegna centrale, evidenziano una situazione estremamente grave, con tassi di prevalenza del 92,8% accompagnata da una fertilità (27,1%) più elevata ( 6,9-7,3%) rispetto ad altre aree.
Il persistere del fenomeno delle macellazioni clandestine, praticate nel 93,5% degli allevamenti dell’isola, tende ad aumentare in ragione dei sempre più elevati costi che gli allevatori sono costretti a sostenere per le macellazioni. L'attività di macellazione risulta infatti oggi gravata da obblighi, responsabilità e balzelli talmente gravosi che solo le situazioni produttive più avvantaggiate possono sostenere.
Recenti indagine epidemiologiche sui cani hanno consentito di rilevare alcuni dati interessanti circa la diffusione dell’Echinococcosi negli ospiti definitivi e hanno confermato nei cani da pastore e da caccia prevalenze comprese fra il 3% e il 10% a seconda delle metodiche utilizzate.
A tutt’oggi la metodica più affidabile per la diagnosi su grande scala di campioni fecali è sicuramente il rilevamento dei coproantigeni, anche se l’utilizzo di sistemi che impiegano anticorpi monoclonali (Mabs), che darebbe maggiore specificità e sensibilità alla metodica, non risulta ancora definitivamente standardizzata. La copro-PCR per la ricerca diretta del DNA del parassita, risulta sicuramente un test molto attendibile per l’elevato grado di specificità e sensibilità, tuttavia la sua applicazione in studi di campo, risulta costosa e non attendibile nel periodo di prepatenza e quando il cestode non elimina le uova nelle feci.
Caratterizzazione biomolecolare e Strain typing
Una caratteristica importante della biologia di Echinococcus granulosus è che questa specie comprende un elevato numero di varianti o di ceppi intraspecifici (strains) che esibiscono una diversità considerevole a livello genetico. La variabilità intraspecifica in E. granulosus può infatti avere importanti implicazioni nel ciclo biologico, nella specificità per l’ospite, così come per le proprietà antigeniche e la dinamica della trasmissione, nonché nell’azione patogena e nella sensibilità all’azione dei chemioterapici. Ciò può avere importanti implicazioni anche per lo sviluppo di vaccini, di nuovi reagenti per la diagnostica e per il trattamento, per l’epidemiologia e la messa a punto di strumenti di controllo dell’echinococcosi.
Gli strains al momento identificati sembrano essere caratterizzati da particolari adattamenti con particolare riguardo al ciclo biologico e all’ospite intermedio. Attualmente studi molecolari basati principalmente su sequenze del DNA mitocondriale (mtDNA), hanno permesso l’identificazione di 10 distinti genotipi (G1-G10) nell’ambito di E. granulosus.
In Italia attualmente sono stati segnalati il ceppo G1 in Sardegna, Sicilia e nel Lazio, anche se si presume che questo sia il ceppo maggiormente circolante nel territorio Italiano, almeno nelle regioni Mediterranee. Sono stati inoltre segnalati il ceppo G2 (Tasmanian sheep strain) e il Ceppo G3 (Buffalo strain) in cisti provenienti da organi umani e animali sia della Sardegna che del Lazio.
In Sardegna è stato inoltre isolato il ceppo G7 (pig strain) nel suino, specie dove fra l’altro è contemporaneamente presente anche il Ceppo G1, con elevati gradi di fertilità. Risulta di particolare importanza ai fini della sanità pubblica il fatto che i ceppi G2 e G3 siano stati isolati nell’uomo e negli animali, e che il G7 sia presente in animali della Sardegna. Quest’ultima variante genetica risulta infatti, assieme al ceppo G1, praticamente endemico nella penisola, una delle più patogene per l’uomo, tanto da essere responsabile nell’Est Europeo di numerosi casi di EC umana.
Nonostante questi importanti progressi nel campo della epidemiologia biomolecolare, non esistono attualmente studi su quelli che siano i ceppi che, in Italia centrale e in particolare in Sardegna, colpiscano l’uomo, e quindi che relazione ci sia con le varianti genetiche presenti e già isolate negli animali domestici.
Educazione sanitaria e consapevolezza del rischio degli addetti ai lavori
Da alcuni micro-sondaggi svolti dalla nostra UO nella Provincia di Nuoro per valutare la fattibilità del presente progetto sul grado di consapevolezza degli allevatori del pericolo CE per la salute pubblica, emergono dei dati allarmanti su uno stato di diffusa ignoranza. Infatti, se può sembrare confortante il fatto che il 67,5% degli allevatori interpellati dichiari di trattare farmacologicamente i cani contro i Cestodi, dai dati ottenuti appare chiaro come questo valore sia decisamente sovrastimato, in quanto la percentuale di allevatori che effettua trattamenti antiparassitari corretti (Praziquantel) nei cani è solo il 15% del totale mentre una larga percentuale di essi utilizza le Avermectine (23,7%) (Varcasia, dati non pubblicati, 2005). Le macellazioni clandestine o “familiari” sono presenti nel quasi 100% delle aziende e ben il 21% degli allevatori dichiara apertamente di somministrare ai cani visceri crudi. Alla luce di questi dati appare chiaro come sia un obiettivo prioritario condurre oltrechè efficaci protocolli di ricerca anche capillari campagne di educazione sanitaria fra gli addetti ai lavori e non. <<<



