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PROGRAMMA DI RICERCA 2004
italiano - english
Unità di Ricerca
- Università degli Studi di NAPOLI "Federico II"
PEDIATRIA
NAPOLI(NA) - Università degli Studi di TRIESTE
BIOLOGIA
TRIESTE(TS) - Università degli Studi di TRIESTE
SCIENZE DELLA RIPRODUZIONE E DELLO SVILUPPO
TRIESTE(TS) - Università degli Studi di NAPOLI "Federico II"
PEDIATRIA
NAPOLI(NA) - Università degli Studi del PIEMONTE ORIENTALE "Amedeo Avogadro"-Vercelli
SCIENZE MEDICHE
VERCELLI(VC)
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Classificazione scientifico-disciplinare
- Area scientifico disciplinare: Scienze mediche
Classificazione brevettuale
- HUMAN NECESSITIES
- MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES (bringing into special physical form A61J [N: mechanical aspects]; chemical aspects of, or use of materials for deodorisation of air, for disinfection or sterilisation, or for bandages, dressings, absorbent pads or surgical articles A61L; compounds per se C01, C07, C08, C12N; soap compositions C11D; micro-organisms per se C12N) [C0203]
- MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
Classificazione geografica
- Regione: Campania
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Parole Chiave
AUTOIMMUNITA'; IMMUNITA' MUCOSALE; CELIACHIA; DIABETE TIPO 1; LIBRERIE FAGICHE; TOPI NOD; GLIADINA; INFIAMMAZIONE MUCOSALEAutoimmunita' e intestino
Università degli Studi di Napoli "Federico II"Abstract
Il diabete di tipo 1 è considerato una malattia autoimmune, in cui linfociti T, attivati verso alcuni autoantigeni pancreatici, infiltrano le insule pancreatiche e distruggono le cellule produttrici di insulina. Fattori ambientali quali gli antigeni alimentari ed i virus sono stati associati con il diabete di tipo 1. Il sistema immune dell'intestino rappresenta il collegamento fra i fattori di rischio ambientali ed il diabete di tipo 1. Il topo diabetico non obeso (NOD) è un modello molto bene studiato del diabete autoimmune; l'evidenza della partecipazione del sistema immune dell'intestino nel diabete è fornita pure da questo modello. Recentemente, è stato osservato un ritardato esordio del diabete nei topi NOD che non sono mai stati esposti al glutine. Molto interessante è l'associazione fra la malattia celiaca (MC) ed il diabete di tipo 1, ad avvalorare l' ipotesi che i meccanismi orali di tolleranza sono disturbati nel diabete di tipo 1. Gli anticorpi anti-transglutaminasi (anti-tTG) sono altamente specifici nella diagnosi di MC e sembrano essere prodotti esclusivamente dai soggetti celiaci in risposta all'introduzione del glutine nella dieta. La sintesi degli anti-tTG e' a carico dei B linfociti intestinali mentre i B linfociti circolanti non sono in grado di produrre questi anticorpi. Il phage display di frammenti anticorpali umani ha dimostrato essere un metodo efficace per studiare la risposta immune nelle patologie autoimmunitarie. Secondo questa metodica >>>Coordinatore Scientifico del Programma di Ricerca
Riccardo TRONCONE Università degli Studi di NAPOLI "Federico II"Obiettivo del Programma di Ricerca
1. Caratterizzare in maniera più approfondita l'esistenza di segni infiammatori a livello intestinale in alcuni modelli di autoimmunita'. In particolare sara' investigato il diabete tipo 1, sia attraverso l'analisi di frammenti bioptici intestinali prelevati a pazienti affetti, sia nei modelli animali di malattia, attraverso l'analisi dell'intestino di topi NOD. Nei primi, in cui dati preliminari ottenuti con metodiche immunoistochimiche gia' suggeriscono la presenza di infiammazione, e nei secondi, sara' investigato il pattern di citochine prodotte.2. Verificata la presenza di infiammazione mucosale sara' esplorata l'ipotesi che fattori della dieta, e segnatamente il glutine a causa delle sue peculiari caratteristiche fisico chimiche e di dati che ne suggeriscono la capacita' di attivare meccanismi dell'immunita' innata, concorrano a generare infiammazione intestinale e, attraverso questa, a favorire l'innesco di fenomeni autoimmuni. Nei pazienti saranno percio' ricercati i segni di attivazione della risposta immunitaria mucosale alla gliadina. Cio', sia attraverso il tentativo di generare linee T gliadino-specifiche dalla mucosa, sia attraverso l'impiego di modelli gia' validati, quali la cultura d'organo della mucosa intestinale; in quest'ultimo caso in frammenti coltivati in presenza di gliadina si valutera' il pattern di citochine espresso. Per cio' che riguarda i topi NOD dalla mucosa e dai linfonodi mesenterici si genereranno linee di cellule T; >>>
Risultati parziali attesi
Fase 1 (12 mesi)Risultati parziali attesi
Caratterizzazione del pattern di citochine espresso a livello della mucosa intestinale di pazienti diabetici. Saranno utilizzate tecniche immunoistochimiche e tecniche di PCR real time. Saranno inoltre generate linee T, e anche in questo caso con tecniche ELISPOT e tecniche di immunofluorescenza intracitoplasmatica caratterizzato il pattern di citochine.
Caratterizzazione del pattern di citochine espresso a livello della mucosa intestinale di topi NOD. Questo sarà esplorato completamente attraverso l'uso della PCR real time. Allo stesso tempo saranno ottenute linee delle cellule di T dalla mucosa del piccolo intestino di topi NOD allevati con una dieta contenente glutine, così come quelle ottenute dai linfonodi mesenterici e dalla milza.
Allestimento di librerie fagiche utilizzando RNA estratto da pazienti affetti da diabete tipo 1, familiari di primo grado di pazienti affetti da diabete tipo 1, soggetti affetti da altra patologia autoimmune (epatite autoimmune, tiroidite di Hashimoto, artrite reumatoide), familiari di primo grado di celiaci. Allestimento di librerie fagiche utilizzando RNA estratto dall'intestino di topi NOD. Ricerca e caratterizzazione di anticorpi celiachia-associati (antitransglutaminasi) e diabete associati (GAD65, IA2, insulina). Allestimento di librerie fagiche anche da biopsie della mucosa orale.
Potenziamento delle possibilit >>>



