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INIZIO_TESTO_DA_INDICIZZARE

PROGRAMMA DI RICERCA 2004

italiano - english
Unità di Ricerca
Programmi di ricerca simili:
Classificazione scientifico-disciplinare
Classificazione brevettuale
  • CHEMISTRY; METALLURGY
    • BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
      • MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF (biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, containing micro-organisms, viruses, microbial fungi, enzymes, fermentates or substances produced by or extracted from micro-organisms or animal material A01N63/00; food compositions A21, A23; medicinal preparations A61K; chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings, absorbent pads or surgical articles A61L; fertilisers C05); PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS (preservation of living parts of humans or animals A01N1/02); MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA (micro-biological testing media C12Q)
Classificazione geografica
Bibliografia
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Parole Chiave
VESCICOLE DI MEMBRANA EXTRACELLULARI; ESOSOMI; MECCANISMI DELLA PROGRESSIONE NEOPLASTICA; ENZIMI PROTEOLITICI ASSOCIATI A MEMBRANA; ANGIOGENESI; GANGLIOSIDI; VACCINI CONTRO I TUMORI; MEDULLOBLASTOMA; BARRIERA EMATO-ENCEFALICA

COMUNICAZIONI INTERCELLULARI MEDIATE DA VESCICOLE DI MEMBRANA: RUOLO IN SISTEMI NORMALI E NELLA PROGRESSIONE NEOPLASTICA.

Università degli Studi di Palermo
Abstract
La ricerca concerne lo studio delle vescicole rilasciate da cellule tumorali e da cellule non trasformate nel mezzo extracellulare, e del ruolo di queste strutture nelle comunicazioni tra cellule. Gli aspetti analizzati saranno i seguenti:
- La provenienza delle molecole che si addensano nelle vescicole (U.O. Sorice e Vittorelli) e la modulazione del fenomeno di vescicolazione (U.O. Dolo e Vittorelli).
- La composizione di vescicole rilasciate da cellule tumorali invasive sia per quanto concerne la componente lipidica, con speciale riferimento alla presenza di gliolipidi e gangliosidi (U.O. Sorice), che per quanto concerne la componente proteica, con speciale riferimento al contenuto in enzimi prteolitici (U.O. Dolo e Vittorelli).
- Il ruolo di gangliosidi associati alle vescicole di membrana nella crescita e nell'invasività tumorale (U.O. Maroder e Sorice)
- Il ruolo di enzimi proteolitici associati alle vescicole nella induzione dell'invasività tumorale e dell'angiogenesi (U.O. Dolo e Vittorelli)
- Le vie di segnalazione inescate dall'interazioni tra le vescicole extracellulari prodotte dal tumore e l'organismo ospite (UO. Dolo, Maroder, Rughetti e Sorice).
- La possibile fusione di vescicole extracellulari con cellule bersaglio e quindi la possibilità che molecole segnlatrici possano essere rilasciate direttamente nel citoplasma della cellula bersaglio (U.O. Dolo).
- La possibilità di utilizzare le vescicole prodotte dalle >>>

Coordinatore Scientifico del Programma di Ricerca
Maria Letizia VITTORELLI Università degli Studi di PALERMO
Obiettivo del Programma di Ricerca
L'obiettivo del programma è l'approfondimento delle conoscenze sui meccanismi di formazione di vescicole extracellulari e sul ruolo di tali vescicole nei meccanismi di interazione cellulare, sia nella progressione neoplastica che in sistemi normali. E' noto che gli esosomi, vescicole extracellulari di dimensioni molto piccole che derivano dal compartimento endo-lisosomale, hanno un ruolo importante di promozione della risposta immunitaria. Il modo in cui essi agiscono, la valutazione della presenza contemporanea in queste strutture di antigeni tumorali e di molecole costimolatrici, e quindi la possibilità di utilizzare gli esosomi per indurre una risposta immunitaria antitumorale, saranno l'obbiettivo dello studio dell'U.O. coordinata dalla Prof. Rughetti. Le vescicole utilizzate per questi esperimenti verranno ottenute da cellule trasfettate con gli antigeni tumorali Erb-B2 e MUC1. La corretta localizzazione di questa mucina verrà valutata dall'U.O. Sorice che valuterà anche se lo stato di sializzazione della mucina è quello osservato in cellule tumorali, e se la molecola è presente sulle vescicole. La distribuzione antigenica di Erb-B2 e di MUC1, potranno essere valutate anche tramite esperimenti di immunolocalizzazione al M.E. e al microscopio confocale con esperimenti in collaborazione tra le U.O. Rughetti e Dolo. Queste due U.O. potranno interagire anche in modo diverso: la U.O. Dolo potrà fornire vescicole ottenute da cellule di tumore ovarico alla U.O. Rughetti che >>>

Risultati parziali attesi
I risultati attesi possono essere riferiti ai singoli punti della ricerca elencati in precedenza.

- Caratterizzazione delle vescicole.

Si otterrà una più puntuale caratterizzazione delle vescicole rilasciate da cellule di varia natura (Cellule endoteliali provenienti dal cordone ombelicale, cellule tumorali più o meno invasive). La caratterizzazione verrà condotta sia dal punto di vista della componente proteica che dal punto di vista della componente lipidica. Per quanto concerne la caratterizzazione della componente proteica si studieranno le interazioni della proMMP-9 con la MT1-MMPe successivamente, dopo aver ottenuto cellule incapaci di sintetizzare MMP-9 si individuerà il dominio proteico coinvolto in questa associazione valutando la capacità delle vescicole rilasciate da queste cellule di legare forme proenzimatiche, attive o parzialmente delete della molecola aggiunte alla coltura. Si identificheranno altri enzimi litici espressi nelle vescicole di cellule a diverso grado di invasività e si evidenzieranno le cascate di attivazione proteolitica che hanno luogo nelle vescicole. Per quanto concerne la caratterizzazione della componente lipidica l'analisi permetterà di valutare il contenuto in gangliosidi di vescicole prodotte da varie linee cellulari.

- Studio dei meccanismi che modulano la liberazione delle vescicole.

Si determinerà l'espressione nelle membrane plasmatiche e nelle membrane delle vescicole di >>>

Durata
24 mesi
Base di partenza scientifica nazionale o internazionale
Le cellule eucariotiche rilasciano nel mezzo extracellulare delle vescicole di vario tipo che si suppone abbiano origini e funzioni diverse e che vengono indicate con nomi differenti.
La popolazione descritta per prima è formata da vescicole che derivano dalla membrana cellulare con un meccanismo morfologicamente simile a quello della gemmazione virale. Queste vescicole vengono chiamate vescicole di membrana. La loro produzione è un fenomeno attivo, che richiede la sintesi di RNA e proteine (Dainiak, 1991) e si osserva in cellule vitali, che non mostrano segni di apoptosi o necrosi (Taverna et al. 2003). Le membrane delle vescicole trasportano la maggior parte degli antigeni espressi sulla membrana delle cellule che le hanno prodotte (Dolo et al. 1995a), ma originano da domini della membrana plasmatica arricchiti selettivamente in alcune componenti come molecole HLA di classe I, integrine beta1 e gelatinasi B/MMP-9 (Dolo et al. 1998). Studi preliminari hanno anche indicato una distribuzione selettiva del gangliodisde GD3 sulla membrana di cellule di carcinoma ovarico umano, CABA I (Dolo et al., 1997), e un addensamento della molecola su vescicole liberate dalle cellule nel mezzo di coltura (Dolo et al., 2000). E' probabile che l'addensamento sulle vescicole di particolari molecole abbia importati conseguenze sulle funzioni biologiche di queste strutture.
La relazione tra produzione di vescicole extracellulari e progressione tumorale è indicata da numerosi >>>