Vai al contenuto| Home page|

   Ti trovi in: HOME »Programmi, progetti e risultati »I progetti »PRIN - Programmi di ricerca di Rilevante Interesse Nazionale»Programma di ricerca
INIZIO_TESTO_DA_INDICIZZARE

PROGRAMMA DI RICERCA 2004

italiano - english
Unità di Ricerca
Programmi di ricerca simili:
Classificazione scientifico-disciplinare
Classificazione brevettuale
  • CHEMISTRY; METALLURGY
    • BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
      • MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES OR MICRO-ORGANISMS (immunoassay G01N33/53); COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
      • MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF (biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, containing micro-organisms, viruses, microbial fungi, enzymes, fermentates or substances produced by or extracted from micro-organisms or animal material A01N63/00; food compositions A21, A23; medicinal preparations A61K; chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings, absorbent pads or surgical articles A61L; fertilisers C05); PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS (preservation of living parts of humans or animals A01N1/02); MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA (micro-biological testing media C12Q)
  • HUMAN NECESSITIES
    • MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
      • METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION, OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS, OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS, OR SURGICAL ARTICLES (preservation of bodies or disinfecting characterised by the agent employed A01N; preserving, e.g. sterilising, food or foodstuffs A23; preparations for medical, dental or toilet purposes A61K; preparation of ozone C01B13/10)
Classificazione geografica
Bibliografia
Baccarani Contri M., Vincenzi D., Cicchetti F., Mori G., Pasquali Ronchetti I. Immunochemical localization of proteoglycans within normal elastin fibre Eur J. Cell Biol. 53:305-312,1990
Baccarani Contri M., Taparelli F, Pasquali Ronchetti I. Osteopontin is a constitutive component of normal elastic fibers in human skin and aorta. Matrix Biol., 14:553-560,1994a
Baccarani Contri M., Vincenzi D., Cicchetti F., Pasquali Ronchetti I. Immunochemical identification of abnormal constituents in the dermis of pseudoxanthoma elasticum patients.
Eur J Histochem. 38:111-123, 994b
Baccarani Contri M., Boraldi F., Taparelli F., De Paepe A., Pasquali Ronchetti I. Matrix proteins with high affinity for calcium ions are associated with mineralization within the elastic fibers of Pseudoxanthoma elasticum dermis. Am.J.Pathol., 148:569-577,1996
Bergen Bergen, A.A., Plomp, A.S., Schuurman, E.J., Terry, S., Breuning,, M., Dauwerse H., Swart, J., Kool, M., van-Soest, S., Baas, F., ten-Brink, J.B., and de Jong, P.T.V.M. Nat. Genet. 25: 228-231,2000
Boraldi F., Quaglino D., Croce MA., Garcia Fernandez.MI., Tiozzo R., Gheduzzi D., Bacchelli B., Pasquali Ronchetti I. Calcein trasport in human dermal fibroblasts: Comparison between cells from normal subjects and from MRP6-deficient Pseudoxanthoma elasticum (PXE) patients. Matrix Biol.22:491-500,2003
Boraldi F., Bini L., Liberatori S., Armini A., Pallini V., Tiozzo R., Pasquali Ronchetti I, Quaglino D. Normal human dermal fibroblasts: proteomic analysis of cell layer and culture medium. Electrophor, 24:1292-310,2003
Boraldi F., Bini L., Liberatori S., Armini A., Pallini V., Tiozzo R., Pasquali Ronchetti I., Quaglino D. Proteome analysis of dermal fibroblasts cultured invitro from human healthy subjects of different ages. Proteomics 3:917-29,2003
Borst P., Evers R., Kool M., Wijnholds J., The multidrug resistance proteinfamily. Biochim. Biophys Acta 1461:347-57,1999
Danielsen L., and Kobayasi T. Pseudoxanthoma elasticum. An ultrastructural study of oral lesions. Acta Dermatovener (Stockholm) 54:173-6,1974
Fornieri C., Baccarani Contri M., Quaglino D., Pasquali Ronchetti I. Lysyl oxidase activity and elastin-glycosaminoglycans interactions in growing chick and rat aortas. J. Cell Biol., 105:1463-1469,1987
Fornieri C., Quaglino D., Baccarani Contri M., Davidson JM., Algeri S. Pasquali Ronchetti I. The effect of caloric restriction on the aortic tissue of aging rats. Connect.Tissue Res. 40:131-143,1999
Gheduzzi D., Taparelli F., Quaglino D. Jr., Di Rico C., Bercovitch L., Terry S., Singer DB., Pasquali Ronchetti I., The placenta in pseudoxanthoma elasticum: structural and immuno-cytochemical study. Placenta. 22:580-90,2001
Gheduzzi D., Sammarco R., Quaglino D., Terry S., Bercovitch L., Pasquali Ronchetti I. Systemic connective tissue alterations in Pseudoxanthoma elasticum. Ultrastr. Path. 27:1-11,2003
Gordon S.G., Overland M., Foley J. Evidence for increased protease activity secreted from cultured fibroblasts from patients with pseudoxanthoma elasticum. Connect.Tissue Res. 6,61-68,1978
Gordon S.G., Hinkle L.L., Shaw E., Cysteine protease characteristics of the proteoglycanase activity from normal and pseudoxanthoma elasticum (PXE) fibroblasts. J.Lab.Clin.Med. 102:400-410,1983
Hollo Z. Calcein accumulation as a fluorimetric functional assay of the multidrug transporter. Biochim.Biophys. Acta 384:1191-98,1994
Iadarola P., Annovazzi A., Lupi A., Luisetti M., Casado B., Doering G., Worlitzsch D., Cetta G., Viglio S. Capillary electrophoresis as a modern tool for determining proteolythic activities in purified specimens and in real samples. J.Liq.Chromat.Rel.Technol. 25:1919-45,2002
Ilias A., Urban Z., Seidi TL., Le Saux O., Sinko E., Boyd C.D., Sarkade B., Varadi A. Loss of the ATP-depending transport activity in Pseudoxanthoma elasticum-associated mutants of human ABCC6 (MRP6). J. Biol. Chem., 277:16860-7,2002
Klein I., Sarkadi B., Varadi A. An inventory of the human ABC proteins. Biochim. Biophys. Acta 1461:237-62,1999
Kool M., van der Linden M., de Haas M., Baas F., Borst P., Expression of human MRP6, a homologue of the multidrug resistance protein gene MRP1, in tissues and cancer cells. Cancer Res., 59:175-82,1999
Le Saux O., Urban Z., Tschuch C., Csiszar K., Bacchelli B., Quaglino D., Pasquali Ronchetti I., Pope M., Richards A., Terry S., Berchovitch L., De Paepe A., Boyd C. Mutations in a gene encoding an ABC transporter cause Pseudoxanthoma elasticum. Nat Gen 25:223-227,2000
Le Saux O., Beck K., Sachsinger C., Silvestri C., Treiber C., Goring HHH., Johnson EW., de Paepe A., Pope FM., Pasquali Ronchetti I., Bercovitch L., Terry S., Boyd CD. A spectrum of ABCC6 mutations is responsible for Pseudoxanthoma elasticum. Am.J.Hum. Gen. 69:749-64,2001
Madon J., Hagenbuch B., Landmann L., Meier PJ , Stieger B. Transport function and hepatocellular localization of mrp6 in rat liver. Mol. Pharmacol., 57:634-41,2000
Martinez-Hernandez, A., Huffer, W.E. Pseudoxanthoma elasticum: dermal polyanions and the mineralization of elastic fibers. Lab. Invest. 31:181-186,1974
Neldner K., and Struk B. Pseudoxanthoma elasticum. In: Connective Tissue and Its Heritable Disorders. Molecular, Genetic and Medical Aspects. Royce PM, Steinmann B, Eds., Wiley-Liss & Sons, New York, 2002, pp561-583
Pasquali Ronchetti I., Volpin D., Baccarani Contri M., Castellani I., Persico A. Pseudoxanthoma elasticum: biochemical and ultrastructural study. Dermatologica 163:307-326,1981
Pasquali Ronchetti I., Bressan G.M., Fornieri C., Baccarani Contri M.,Volpin D. Elastin fibers associated glycosaminoglycans in -aminopropio-nitrile induced lathyrism. Exp. Mol. Path. 40:235-245,1984
Pasquali Ronchetti I., Baccarani Contri M., Pincelli C., Bertazzoni M.G. Effect of selective enzymatic digestions on skin biopsies from Pseudoxanthoma elasticum patients. Arch. Dermatol. Res., 278:386-392,1986
Pasquali Ronchetti I., Baccarani Contri M., Fornieri C., Quaglino D., Mori G. Structure and composition of the elastin fibre in normal and pathological conditions. Micron, 24:75-89,1993
Pasquali Ronchetti I., Fornieri C., Baccarani Contri M., Quaglino D. Ultrastructure of elastin. In. The molecular biology and pathology of elastic tissues. (Ciba Foundation Symp. 192) Wiley Chichester, pp 31-50,1995
Pasquali Ronchetti I.,Baccarani Contri M. The elastic fiber during development and aging. Microsc.Res.Tech., 38:428-435,1997
Passi A., Albertini R., Baccarani-Contri M., De Luca G., De Paepe A., Pallavicini G., Pasquali Ronchetti I.,Tiozzo R. Proteoglycan alterations in skin fibroblast cultures from patients affected with Pseudoxanthoma elasticum. Cell Biochem Funct., 14:111-120,1996
Quaglino D. , Fornieri C., Nanney LB., Davidson JM. Extracellular matrix modifications in rat tissues of different ages. Correlations between elastin and collagen type I expression and lysyl oxidase activity. Matrix, 13:481-490, 993
Quaglino D., Bergamini G., Boraldi F., Manzini E., Davidson JM., Pasquali Ronchetti I. Connective tissue in skin biopsies from patients suffering systemic sclerosis. J. Submicrosc. Cytol. Pathol., 28: 86-296,1996
Quaglino D., Boraldi F., Barbieri D., Croce A. Tiozzo R., Pasquali Ronchetti I. Abnormal phenotype of in vitro dermal fibroblasts from patients with pseudoxanthoma elasticum (PXE). Biochim. Biophys. Acta 1501:51-62,2000
Ringpfeil, F, Lebwohl, M.G., Christiano, A.M., and Uitto, J. PNAS 97: 6001-6,2000
Scheffer G.L., Hu X., Pijnenborg A.C.L.M., Wijnholds J., Bergen A.A.B., Scheper R.J. MRP6 (ABCC6) detection in normal human tissues and tumors. Lab. Invest., 82:515-518,2002
Tiozzo Costa R., Baccarani Contri M, Cingi M.R., Pasquali Ronchetti I., Salvini R., Rindi S., De Luca G. Pseudoxanthoma elasticum (PXE): ultrastructural and biochemical study on proteoglycan and proteoglycan-associated material produced by skin fibroblasts in vitro. Collagen Rel. Res., 8: 49-64,1988
Parole Chiave
TESSUTO CONNETTIVO; ELASTINA; PSEUDOXANTHOMA ELASTICUM; PROTEOMA; PROTEOGLICANI; PROTEASI; ESPRESSIONE GENICA; MALATTIA GENETICA; DISORDINE DEL METABOLISMO

INDAGINI SULLA PATOGENESI DELLE ALTERAZIONI CONNETTIVALI NELLO PSEUDOXANTHOMA ELASTICUM (PXE)

Università degli Studi di Modena e Reggio Emilia
Abstract
Mutazioni nel gene ABCC6, che codifica per il trasportatore di membrana MRP6, causano la malattia genetica Pseudoxanthoma elasticum (PXE) (Le Saux et al., 2000). Il ruolo fisiologico di MRP6 è ancora sconosciuto, tuttavia la sua deficienza funzionale induce molte alterazioni metaboliche e comportamentali dei fibroblasti dermici in coltura suggerendo che il metabolismo dei fibroblasti è pesantemente coinvolto nella deficienza genetica di MRP6 (Passi et al., 1996; Quaglino et al., 2000; Boraldi et al., 2003c). Infatti, le manifestazioni cliniche del PXE coinvolgono i tessuti connettivi lassi (Neldner and Struk, 2002) di tutti gli organi (Gheduzzi et al., 2003). La deficienza di MRP6 induce mineralizzazione e frammentazione delle fibre elastiche, formazione di abnormi fibrille collagene e deposizione di aggregati di costituenti della matrice negli spazi extracellulari (Pasquali Ronchetti et al., 1981; 1986). I danni maggiori sono a carico di retina, vasi e cute. Tali alterazioni suggeriscono che l'ambiente extracellulare è profondamente modificato nel PXE. E' pertanto ragionevole ipotizzare che le manifestazioni cliniche siano il risultato di un metabolismo sbagliato dei fibroblasti per quanto riguarda la sintesi, secrezione e, probabilmente, la degradazione di costituenti della matrice. Il progetto si prefigge l'analisi della espressione genica, della produzione e della degradazione dei principali costituenti della matrice extracellulare da parte di fibroblasti PXE in coltura >>>

Coordinatore Scientifico del Programma di Ricerca
Ivonne RONCHETTI Università degli Studi di MODENA e REGGIO EMILIA
Obiettivo del Programma di Ricerca
L’obiettivo del programma è quello di chiarire la patogenesi delle alterazioni della matrice connettivale nello pseudoxanthoma elasticum (PXE). Il PXE è una malattia genetica causata da mutazioni nel gene ABCC6, il quale codifica per il trasportatore di membrana MRP6. Tale trasportatore appartiene alla famiglia delle Multidrug Resistance Proteins (MRPs), un gruppo di trasportatori di membrana implicati nella extrusione attiva dalle cellule di metaboliti o di specifici prodotti cellulari dopo essere stati glucuronati o glutationati (Borst et al., 1999). Sono ancora sconosciute le molecole fisiologicamente trasportate da MRP6 (Ilias et al., 2002). Inoltre, è impossibile al momento delineare una relazione fra deficiente attività di tale trasportatore e le alterazioni della matrice connettivale, ed in particolare della fibra elastica, caratteristiche del PXE. Infatti, il PXE è una patologia del tessuto connettivo lasso di ogni organo (Gheduzzi et al., 2003) e colpisce prevalentemente la cute ed il sistema cardiocircolatorio (Neldner and Struk, 2002). Bisogna pertanto ammettere che le alterazioni connettivali nel PXE siano la conseguenza indiretta di alterazioni metaboliche cellulari causate a loro volta dalla deficienza funzionale del trasportatore MRP6. Tali alterazioni metaboliche sembrano causare profonde modificazioni per quanto concerne la deposizione della matrice extracellulare. Osservazioni sporadiche di vari gruppi di ricerca, compreso il nostro, hanno mostrato >>>

Risultati parziali attesi
Le metodiche da utilizzare così come la strumentazione necessaria per i saggi proposti sono tutte a disposizione dei singoli gruppi di ricerca. Ciò potrà permettere di ottenere risultati abbastanza rapidamente.
I risultati che ci si augura di potere ottenere nella prima fase possono essere così riassunti:
- individuazione nel derma, nel plasma e/o nelle urine dei pazienti di prodotti di sintesi e/o di degradazione del metabolismo connettivale tali da indirizzare allo studio delle tappe patogenetiche di tali alterazioni. L’attenzione è posta sui proteoglicani, sui glicosaminoglicani e sui loro derivati, come pure sui prodotti della degradazione della elastina. Verrà anche valutata la possibilità di utilizzare tali parametri a scopo diagnostico e/o prognostico.
- avviare la individuazione su fibroblasti in vitro di anomalie sintetiche e degradative che possano dare ragione delle alterazioni osservate in vivo.
- misurare la quantità delle proteine prodotte o legate allo strato cellulare da parte di fibroblasti PXE in vitro in confronto a fibroblasti normali.
- valutazione del metabolismo del collagene, una delle componenti della matrice che subisce modificazioni nel PXE, mediante incorporazione di prolina marcata ed esperimenti di pulse and chase sui fibroblasti PXE e sui controlli
- individuazione di proteine anomale sia per quantità che per qualità prodotte da fibroblasti PXE identificate mediante gel elettroforesi >>>

Durata
24 mesi
Base di partenza scientifica nazionale o internazionale
Lo Pseudoxanthoma elasticum (PXE) è una patologia del tessuto connettivo con elastoressi generalizzata e deposizione di calcio nel derma, nei vasi sanguigni e nella membrana di Bruch della retina (Lebwohl et al., 1994; Neldner and Struk, 2002). Nella maggior parte dei casi, questa patologia è ereditata come carattere autosomico recessivo, colpisce le donne in proporzione doppia rispetto agli uomini e presenta una età media di insorgenza intorno ai 13 anni. Le lesioni cutanee appaiono come papule giallastre di circa 1-3 mm oppure come delle placche lineari o irregolari specialmente nelle aree flessurali della cute (piega del gomito, del ginocchio, del collo, dell'ascella, aree inguinali, e periombelicali). E'stato descritto anche un interessamento della mucosa orale, vaginale o rettale. La lassità cutanea può portare alla formazione di pieghe cadenti in particolare sul collo, sulle ascelle e nelle aree inguinali con gravi problemi estetici (Neldner e Struk, 2002). I problemi maggiori sono a carico di occhi e vasi. Le tipiche alterazioni oculari sono rappresentate da strie angioidi che irradiano dalla pupilla, un generale aspetto a buccia d’arancia , pigmentazioni irregolari , episodi emorragici specialmente nell’area della macula e cicatrici a carico della corioidea. In alcuni casi sono state osservate aree depigmentate alla periferia della retina. Le emorragie retiniche iniziano generalmente nella seconda-terza decade di vita. I pazienti con PXE presentano una >>>