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PROGRAMMA DI RICERCA 2005
italiano - english
Unità di Ricerca
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Classificazione scientifico-disciplinare
- Area scientifico disciplinare: Scienze biologiche
Classificazione brevettuale
- CHEMISTRY; METALLURGY
- BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF (biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, containing micro-organisms, viruses, microbial fungi, enzymes, fermentates or substances produced by or extracted from micro-organisms or animal material A01N63/00; food compositions A21, A23; medicinal preparations A61K; chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings, absorbent pads or surgical articles A61L; fertilisers C05); PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS (preservation of living parts of humans or animals A01N1/02); MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA (micro-biological testing media C12Q)
- WINE; OTHER ALCOHOLIC BEVERAGES; PREPARATION THEREOF (beer C12C)
- BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
Classificazione geografica
- Regione: Veneto
Bibliografia
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Parole Chiave
SVILUPPO DEL FRUTTO; POMODORO; RNA SILENCING; ESPRESSIONE GENICA; FUNZIONE GENICA; INGEGNERIA GENETICA; BIOTECNOLOGIE VEGETALIRNA silencing di geni coinvolti nello sviluppo del frutto
Università degli Studi di VeronaAbstract
Il programma di ricerca utilizza metodiche di RNA silencing per studiare geni coinvolti nello sviluppo del frutto di pomodoro. Cinque cDNA, scelti sulla base della loro espressione durante fasi precoci dello sviluppo del frutto, saranno utilizzati per indurre RNA silencing in piante transgeniche. A tal fine costrutti genici a forcina saranno introdotti nel genoma di piante di pomodoro per produrre RNA a doppio filamento ed indurre il silencing specifico dei geni di interesse. Eventi indipendenti di trasformazione (T0) saranno pertanto caratterizzati a livello molecolare (Southern, northern) e fenotipico (es. sviluppo del frutto). L'analisi sarà estesa alla progenie dei trasformanti primari per dimostrare la cosegregazione del fenotipo con il gene introdotto presente nel T-DNA insieme al gene marcatore (resistenza alla kanamicina). In parallelo costrutti genici sintetici iperesprimenti il prodotto genico di interesse saranno introdotti in piante di pomodoro. I geni sintetici utilizzati codificano per la stessa proteina pur avendo un'omologia di sequenza nucleotidica inferiore al 65%. Tali geni sintetici permetteranno di evidenziare eventuali effetti fenotipici causati dall'iperespressione del gene di interesse. Inoltre saranno utilizzati in incroci con piante silenziate per causare la reversione delle modifiche causate allo sviluppo del frutto nelle piante silenziate. Questo secondo obiettivo dovrebbe essere possibile in quanto la bassa omologia a livello nucleotidico e la >>>Coordinatore Scientifico del Programma di Ricerca
Angelo SPENA Università degli Studi di VERONAObiettivo del Programma di Ricerca
Il programma di ricerca ha l'obiettivo di individuare geni coinvolti nel controllo di fasi precoci dello sviluppo del frutto di pomodoro.A tal fine si utilizzeranno metodiche di RNA silencing basate su costrutti sviluppati dal gruppo di ricerca. La metodica di RNA silencing utilizzata è stata già testata in pomodoro ed è capace di silenziare efficientementi il gene bersaglio.
Cinque cDNA, scelti sulla base del loro pattern di espressione durante fasi precoci dello sviluppo del frutto, saranno utilizzati in esperimenti di RNA silencing. L'identificazione dei cinque cDNA è stata eseguita nell'ambito di un progetto FIRB che ha utilizzato frutti partenocarpici per lo studio delle fasi precoci dello sviluppo del frutto.
Durata
24 mesiBase di partenza scientifica nazionale o internazionale
Il pomodoro è la specie orticola di maggior interesse agricolo. Il frutto di pomodoro, oltre ad avere rilevanza economica, rappresenta un sistema modello per lo studio dello sviluppo del frutto.Lo sviluppo del frutto di pomodoro può essere diviso in tre fasi. La prima fase corrisponde all'allegagione che rappresenta l'inizio della crescita dell'ovario in frutto. La seconda e la terza fase corrispondono alla crescita del frutto dovuta, rispettivamente, primariamente a divisione cellulare e poi a distensione cellulare. Alla fine della terza fase, la crescita del frutto è completa ed il frutto inizia il processo di maturazione.
Nel corso degli ultimi 10 anni, gli stadi tardivi dello sviluppo del frutto (i.e. post-antesi) e la sua maturazione sono stati studiati sia a livello biochimico sia genetico. Recentemente, il database delle EST di pomodoro (http://www.tigr.org/tdb/lgi/), che contiene circa 40000 sequenze derivate da frutti a diversi stadi di sviluppo, ha facilitato l'analisi globale dei profili di espressione durante la crescita e la maturazione del frutto con strumenti di analisi genomica.
Le fasi precoci dello sviluppo del frutto, rappresentate dall'allegagione e dalla crescita iniziale dell'ovario, hanno ricevuto un'attenzione minore, pur avendo importanza sia euristica che applicata. Ad esempio, la frequenza di allegagione (il numero di fiori che sviluppano frutti sul numero totale dei fiori) determina il numero di frutti per pianta e quindi ne >>>



