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INIZIO_TESTO_DA_INDICIZZARE

PROGRAMMA DI RICERCA 2006

italiano - english
Unità di Ricerca
Programmi di ricerca simili:
Classificazione scientifico-disciplinare
Classificazione brevettuale
  • CHEMISTRY; METALLURGY
    • BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
      • FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESIZE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE (fermentation processes to form a food composition A21, A23; compounds in general, see the relevant compound class, e.g. C01, C07; brewing of beer C12C; producing vinegar C12J; processes for producing enzymes C12N9/00; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification C12N15/00)
      • MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES OR MICRO-ORGANISMS (immunoassay G01N33/53); COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
      • MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF (biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, containing micro-organisms, viruses, microbial fungi, enzymes, fermentates or substances produced by or extracted from micro-organisms or animal material A01N63/00; food compositions A21, A23; medicinal preparations A61K; chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings, absorbent pads or surgical articles A61L; fertilisers C05); PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS (preservation of living parts of humans or animals A01N1/02); MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA (micro-biological testing media C12Q)
Classificazione geografica
Bibliografia
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Parole Chiave
ACARO DELLA POLVERE, IMMUNOTERAPIA SPECIFICA, ESPRESSIONE E PRODUZIONE DI ALLERGENI RICOMBINANTI, NICOTIANA BENTHAMIANA, PICHIA PASTORIS

Allergeni ricombinanti ottenuti a partire da ceppi italiani di Dermatophagoides pteronyssinus e loro utilizzazione nella diagnosi allergologica molecolare finalizzata a realizzare interventi di profilassi e terapia specifici nei confronti dei profili di reattività individuale dei singoli pazienti

Università degli Studi di Perugia
Abstract
Negli ultimi anni si è assistito ad un aumento progressivo delle allergopatie e studi epidemiologici sottolineano che circa il 25% della popolazione dei paesi industrializzati soffre di patologie allergiche mediate da IgE. La ricerca scientifica in questo ambito sta fornendo contributi rilevanti alla diagnosi di allergopatie di origine diversa. Tra le principali forme di allergia, spiccano quelle causate dall’acaro della polvere (Dermatophagoides pteronyssinus) per il quale sono stati caratterizzati 19 allergeni e clonati i rispettivi geni (Thomas et al., 2002; Lee et al., 2004). La caratterizzazione funzionale e molecolare di questi allergeni è stata condotta su cloni commerciali dell'acaro della polvere (CSL-Ltd, Australia). Tuttavia, analisi molecolari hanno evidenziato varianti polimorfiche degli allergeni maggiori (Der p 1 e Der p 2) e di quelli del gruppo 10 (Der p 10) (Smith et al., 2001; Lucentini et al., 2005 a, b). Si ritiene che la conoscenza e il monitoraggio di tali polimorfismi possano consentire l’allestimento di preparati a fini diagnostici e terapeutici idonei alla specifica popolazione o al singolo individuo (Smith et al., 2001). Due sequenze polimorfiche di Der p 1 del ceppo Italiano di D.pteronyssinus sono state da noi isolate e registrate (www.ncbi.nlm.nih.gov) come I-Der p 1 (gi61608444) e I-Der p 10 (gi80553469). Der p 1 è una cisteina proteasi (Takai et al., 2005) ed è considerato l'antigene maggiore dell'acaro della polvere (Thomas et >>>

Coordinatore Scientifico del Programma di Ricerca
Francesco Marcucci Università degli Studi di PERUGIA
Obiettivo del Programma di Ricerca
Il presente progetto si pone come obiettivi:
1) produzione con elevata efficienza delle proteine allergeniche ricombinanti I-Der p 1 e I-Der p 10 dal ceppo italiano di D. pteronyssinus utilizzando almeno due diversi sistemi di espressione in vitro (Pichia pastoris e Nicotiana benthamiana);
2) campionamento di acari della polvere per individuare nuove varianti alleliche di Der p 1 e Der p 10 da ceppi italiani di D. pteronyssinus da località del Nord, Centro e Sud Italia;
3) analisi delle proprietà biologiche ed immunologiche degli allergeni ricombinanti sintetizzati e loro confronto con quelle della controparte naturale e con quelle del Der p 1 ricombinante commerciale;
4) selezione e suddivisione dei pazienti per ITS in due gruppi di cui uno (A) positivo ai soli allergeni a basso peso molecolare (Der p 1, Der p 2) e un secondo gruppo (B) con positività anche agli allergeni ad alto pm come quelli degli acari delle derrate;
5) selezione degli estratti per ITS più idonei per il gruppo A, mediante allergeni naturali e commerciali;
6) standardizzazione dei nuovi ricombinanti confrontandoli con quelli naturali e commerciali (punto 5);
7) Selezione finale dell’estratto ITS mediante RAST e RAST inibizione e immunoblotting per Der p 10;
8) Valutazione della sicurezza, efficacia ed attività immunologica dell’ITS nei due gruppi di pazienti selezionati.

Durata
24 mesi
Base di partenza scientifica nazionale o internazionale
Negli ultimi anni si è registrato un progressivo aumento delle allergopatie, sia nella popolazione adulta sia in quella infantile, tanto che alcuni ricercatori hanno coniato il termine di "epidemia non infettiva". Studi epidemiologici hanno dimostrato che circa il 20-25% della popolazione vivente nei paesi industrializzati soffre di patologie allergiche mediate dalle IgE (ipersensibilità di tipo I).
Il genere Dermatophagoides appartiene alla famiglia Pyroglyphydae e costituisce, con i suoi due maggiori rappresentanti (D. pteronyssinus e D. farinae) una delle cause più diffuse di allergopatie nell'area Mediterranea. Attualmente la diagnosi e la terapia allergologica vengono condotte mediante estratti naturali di allergeni o miscele di questi. Gli estratti naturali contengono miscele complesse ed eterogenee di proteine, glicoproteine e polisaccaridi, che costituiscono la porzione più direttamente coinvolta nella risposta delle IgE. Tali estratti sono difficili da standardizzare e possono rendere difficoltosa l'individuazione della componente allergenica contro la quale un paziente è sensibilizzato. Inoltre, un altro limite nell'applicabilità di tali estratti è che gli stessi allergeni maggiori possono essere presenti in quantità estremamente variabile in relazione al materiale di partenza (van Ree, 1999). Negli ultimi decenni sono stati individuati, purificati e caratterizzati gli allergeni maggiori che causano le principali allergie (Rossi e >>>