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PROGRAMMA DI RICERCA 2006
italiano - english
Unità di Ricerca
Programmi di ricerca simili:
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Classificazione scientifico-disciplinare
- Area scientifico disciplinare: Scienze agrarie e veterinarie
Classificazione brevettuale
- CHEMISTRY; METALLURGY
- BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES OR MICRO-ORGANISMS (immunoassay G01N33/53); COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
Classificazione geografica
- Regione: Umbria
Bibliografia
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Parole Chiave
ESPRESSIONE GENICA CAVALLO, STRESS, CDNA-AFLP, REAL TIME RT-PCR, GENOMA CAVALLO, MARCATORI POLIMORFICI, BLOCCHI ANCESTRALI CONSERVATI, DUPLICAZIONI SEGMENTALI, FISHAnalisi di genomica funzionale e strutturale degli Equidi
Università degli Studi di PerugiaAbstract
Crescente è oggi l'interesse a livello internazionale per diversi aspetti di genomica strutturale e funzionale del cavallo (Horse Genome Project). Considerata la scarsità di informazioni disponibili il nostro gruppo si propone di effettuare studi di genomica inclusi quelli relativi alle risposte del cavallo atleta allo stress da esercizio, alla mappatura del genoma equino ed allo studio delle patologie del cavallo a livello molecolare. Con la presente ricerca si valuteranno le modificazioni dell'espressione genica in cavalli sottoposti a stress da esercizio fisico o di altro genere attraverso le tecniche di RNA-fingerprintig cDNA-AFLP. La tecnica prevede l'analisi di linfociti dai quali verrà estratto l'RNA totale e poi separato l'mRNA da utilizzare per retrotrascrivere il DNA complementare. Il cDNA sarà poi sottoposto alla metodica AFLP. Le bande di interesse verranno eluite dal gel, riamplificate, clonate, sequenziate e sottoposte ad analisi di sequenza per identificare il trascritto isolato. La tecnica scelta è stata da noi messa a punto ed ottimizzata su tessuti diversi di cavallo. Analizzando cavalli Arabi nel corso di gare di endurance sono stati sequenziarti 49 trascritti modulati. Quattro di questi hanno evidenziato una forte similarità con geni correlabili con la risposta allo stress da esercizio. La loro modulazione è stata confermata mediante RT-PCR e si sono ottenuti i trascritti completi mediante RACE-PCR. La ricerca sarà rivolta >>>Coordinatore Scientifico del Programma di Ricerca
Maurizio Silvestrelli Università degli Studi di PERUGIAObiettivo del Programma di Ricerca
Il progetto si articola su studi di genomica funzionale e strutturale del cavallo volti ad incrementare le scarse conoscenze in tale specie e a fornire strumenti per la selezione ed il benessere del cavallo sportivo.La ricerca dovrebbe essere rivolta all'individuazione di nuovi trascritti modulati dallo stress provando altre combinazioni di primer selettivi e alla conferma dei risultati ottenuti su un campione più ampio di soggetti.
Per questo ci proponiamo di
- Verificare l'effetto dello stress da esercizio sugli stessi soggetti effettuando i prelievi nel corso di gare di endurance di diversa
lunghezza (da 30 a 160 Km).
- Clonare e sequenziare i trascritti modulati e verificare la similarità nell'allineamento con sequenze presenti in banca dati.
- Confermare i dati ottenuti con i cDNA-AFLP tramite Real Time RT-PCR.
- Isolare e caratterizzare tramite RACE-PCR il full-lenght dei messaggeri individuati.
- Effettuare l'analisi cDNA-AFLP anche su altri cavalli in gara o in altre condizioni di stress per avere un quadro più completo del
fenomeno.
- Individuare modificazioni che possano essere eventualmente utilizzate come parametri da affiancare ai comuni test ematologici (concentrazione plasmatica di lattato dopo l'esercizio) per valutare l'affaticamento del cavallo atleta evitando il fenomeno di Overtraining e preservando l'integrità dell'organismo >>>



