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INIZIO_TESTO_DA_INDICIZZARE

UNITA' DI RICERCA

italiano - english
Bibliografia
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Programma di ricerca

STUDIO DEI MECCANISMI DI CONTROLLO DELLA CRESCITA VEGETATIVA IN GENOTIPI DI OLIVO (OLEA EUROPAEA L.) CONTRADDISTINTI DA DIVERSO VIGORE
Università di riferimento
Università degli Studi di TORINO - COLTURE ARBOREE - TORINO(TO)
Responsabile dell'Unità di ricerca
Claudio LOVISOLO
Descrizione
La presente Unità di Ricerca (UR IV) studierà alcuni aspetti fisiologici e molecolari dell'olivo al fine di comprendere come in tale pianta differenti livelli d'illuminazione possono modulare l'espressione delle acquaporine .
In questo studio saranno impiegati due cloni dell'olivo: il Leccino "dwarfing", LD, pianta con crescita ridotta e il clone Leccino Minerva, LM, olivo caratterizzato da una crescita standard.
Il programma di ricerca è composto da due obiettivi . Il primo sarà quello di svolgere un saggio funzionale di due acquaporine clonate in Olea europea (Secchi et al. 2004) attraverso l'espressione delle medesime negli oociti di Xenopus laevis (Eckert et al. 1999). Il secondo obiettivo sarà di studiare l'espressione delle acquaporine in piante sottoposte a differenti livelli d'illuminazione.
Step I. Gli oociti di Xenopus laevis (rana del Sud-Africa) sono spesso usati in sistemi di espressione funzionale. Tale saggio prevede la trascrizione in vitro dei poly(A)cRNA codificanti per OePIP1 ed OePIP2 e le microiniezioni di questi nel citoplasma degli oociti. Alcuni giorni dopo l'iniezione sarà possibile misurare il volume degli oociti, ovvero si valuterà la dinamica del rigonfiamento allorquando la soluzione isosmotica in cui sono conservati sarà gradualmente sostituita da un tampone iposmotico. Il volume degli oociti sarà monitorato e il suo valore registrato a costanti intervalli di tempo. I decrementi di volume nell'unità di tempo restituiranno i valori di permeabilità, secondo Zhang and Verkman (1991).
Step II. Si utilizzerà materiale vegetale proveniente da radice, fusto e foglia di olivi LM ed LD allevati presso l'Unità di Ricerca I, in condizioni di pieno sole e di ombreggiamento al 50% sotto rete. Da tale materiale si estrarrà RNA e, se necessario mRNA, al fine di studiare l'espressione di OePIP1 ed OePIP2 a mezzo di tecnica Northern. L'analisi dell'espressione sarà attuata una volta nell'annata per confronto dell'intensità della banda colorata con digossigenina, o in alternativa, a mezzo di tecniche semiquantitaive RT-PCR.
I livelli d'espressione dei due geni saranno messi a confronto con le performance idrauliche di trasporto e di stato idrico misurate dalle Unità di Ricerca II e V sugli stessi genotipi, ambientati a regimi d'illuminazione potenzialmente fotoinibenti (pieno sole) o no (ombreggiamento al 50%). Il confronto delle risultanze molecolari con quelle idrauliche e fisiologiche aiuterà a capire i meccanismi di sviluppo dei due genotipi nelle prime fasi di crescita, critiche per la presenza di eccessi di luce.